• 華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬同濟(jì)醫(yī)院普通外科（武漢430030）;;
  • 通訊作者： 鄒聲泉，Email： sqzou@tjh.tjmu.edu.cn;

目的觀察反義DNA甲基轉(zhuǎn)移酶3b（DNMT3b）基因真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)染對(duì)人膽管癌QBC-939細(xì)胞中DNMT3b基因表達(dá)的影響。
方法構(gòu)建反義DNMT3b基因真核表達(dá)載體，通過脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染到人膽管癌細(xì)胞株QBC-939中，G418篩選得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株，PCR鑒定外源性neoR基因在轉(zhuǎn)染細(xì)胞中的表達(dá)以確定轉(zhuǎn)染是否成功。半定量RT-PCR觀察轉(zhuǎn)染前后DNMT3b基因mRNA水平的變化，流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染前后DNMT3b蛋白的變化。
結(jié)果反義DNMT3b基因真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)染能使人膽管癌QBC-939細(xì)胞中DNMT3b基因的mRNA水平從0.956±0.053降低至0.209±0.023，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）； 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果顯示，DNMT3b蛋白水平從(75.38±3.22)%降低到(29.87±3.46)%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
結(jié)論反義DNMT3b基因轉(zhuǎn)染能降低人膽管癌QBC-939細(xì)胞中DNMT3b基因的表達(dá)水平，為研究DNMT3b基因功能及其在膽管癌細(xì)胞中的作用提供了方法和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

引用本文： 左石,郭偉,劉民鋒,董涇青,徐立寧,羅劍,鄒聲泉. 反義DNMT3b基因真核表達(dá)載體轉(zhuǎn)染對(duì)人膽管癌細(xì)胞DNMT3b基因表達(dá)的影響. 中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志, 2006, 13(1): 56-60. doi: 復(fù)制

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