目的 探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(BMSCs)作為構(gòu)建小口徑血管種子細(xì)胞的可行性及其誘導(dǎo)機(jī)制。 方法 取體重100 g左右雄性SpragueDawley(SD)大鼠后肢股骨和脛骨骨髓,采用原代全骨髓培養(yǎng)法,多次傳代純化,體外擴(kuò)增后,觀察細(xì)胞形態(tài),并用免疫熒光及流式細(xì)胞儀檢測CD34、CD90、CD105細(xì)胞因子,鑒定是否為BMSCs。將BMSCs分為實驗組和對照組:實驗組使用含全反式維甲酸及二丁酰環(huán)磷酸腺苷(db-cAMP)的低糖基本培養(yǎng)基(DMEM-LG)培養(yǎng);對照組采用普通的DMEMLG培養(yǎng)。觀察誘導(dǎo)后細(xì)胞形態(tài),檢測誘導(dǎo)后第5代細(xì)胞平滑肌α肌動蛋白(SM-α-actin)、鈣結(jié)合蛋白(calponin)、平滑肌肌球蛋白重鏈(SMMHC)的表達(dá)情況。 結(jié)果 原代培養(yǎng)所獲取的細(xì)胞經(jīng)過多次傳代培養(yǎng)后呈長梭形,呈現(xiàn)特征性的漩渦狀生長,檢測CD34陰性,CD90、CD105陽性。實驗組經(jīng)誘導(dǎo)后的BMSCs生長較緩慢,略呈橢圓形,檢測SM-α-actin、calponin、SMMHC顯著表達(dá);對照組的細(xì)胞形態(tài)及生長速度和實驗組BMSCs相似,但不表達(dá)SM-α-actin、calponin和SMMHC。 結(jié)論 BMSCs在全反式維甲酸的誘導(dǎo)下可向血管平滑肌樣細(xì)胞表型分化,可為組織工程構(gòu)建小口徑血管提供平滑肌種子細(xì)胞。
引用本文: 何鳳璞,汪黎明,陳文,等. 大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為血管平滑肌樣細(xì)胞的實驗研究. 中國胸心血管外科臨床雜志, 2011, 18(3): 236-239. doi: 復(fù)制