目的? 糖皮質(zhì)激素的應(yīng)用是引起非創(chuàng)傷性股骨頭缺血性壞死的主要原因之一。通過研究經(jīng)糖皮質(zhì)激素處理后的骨髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞活性氧(reactive?oxygen?species, ROS)的代謝變化,進(jìn)一步探討激素性股骨頭缺血性壞死的發(fā)病機(jī)制。? 方法? 取行人工全髖關(guān)節(jié)置換術(shù)患者自愿捐獻(xiàn)的股骨頭內(nèi)松質(zhì)骨,利用酶消化法分離培養(yǎng)骨髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞,倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)。取第 3 代細(xì)胞,分別與不同濃度(0、 0.03、 0.10、 0.30、 1.00?mg/mL)氫化可的松培養(yǎng)后,采用 MTT 法測(cè)定細(xì)胞增殖抑制率;流式細(xì)胞儀觀測(cè)細(xì)胞凋亡率;采用熒光探針檢測(cè)細(xì)胞中 ROS 含量變化,以及與 ROS 代謝相關(guān)的黃嘌呤氧化酶(xanthine?oxidase,XOD)含量變化。? 結(jié)果? 原代培養(yǎng) 2 ~ 3?d 后,鏡下見單個(gè)細(xì)胞為
梭形,呈鋪路石樣排列; 1周后細(xì)胞趨于融合狀態(tài)。 0.03、 0.10、 0.30、 1.00?mg/mL組細(xì)胞增殖抑制率分別為20.22%?±?2.97%、
22.94%?±?4.52%、 43.98%?±?3.35%、 78.29%?±?3.85%, 0.30、 1.00?mg/mL 組的細(xì)胞增殖抑制率明顯高于 0.03、 0.10?mg/?mL 組(P? lt;?0.05)。0、0.03、0.10、0.30、1.00?mg/mL?組細(xì)胞凋亡率分別為 0.10%?±?0.01%、 0.23%?±?0.02%、 1.83%?±?0.04%、 6.34%?±?0.11%、15.33%?±?0.53%,0.30、1.00?mg/mL 組細(xì)胞凋亡率明顯高于 0?mg/mL 組(P? lt;?0.05)。0、0.30、1.00?mg/?mL 組 ROS含量分別為 57.35?±?7.11、120.47?±?15.68、166.15?±?11.57,XOD 含量分別為 0.017?9?±?0.000?9、0.028?3?±?0.001?7、0.067?7?±?0.004?1;以上兩指標(biāo) 3 組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P? lt;?0.05)。? 結(jié)論? 糖皮質(zhì)激素通過使血管內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi) ROS
生成增加,引起氧化應(yīng)激反應(yīng),進(jìn)而導(dǎo)致細(xì)胞功能受損。
引用本文: 楊雨潤(rùn),婁晉寧,李子榮,孫偉,王佰亮,賈勇圣. 糖皮質(zhì)激素對(duì)骨髓微血管內(nèi)皮細(xì)胞活性氧代謝影響的實(shí)驗(yàn)研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2011, 25(5): 533-537. doi: 復(fù)制