目的 探討瘦素(leptin,LEP)對 hBMSCs 成骨分化的作用及機制。 方法 采用全骨髓法培養(yǎng)hBMSCs,取第3 代hBMSCs 分為A、B、C、D、E、F 組,待細胞貼壁后各組分別加入400、200、100、50 ng/mL LEP 、100 ng/ mL BMP 和普通培養(yǎng)基2 mL 進行培養(yǎng)。于培養(yǎng)后7 d 行ALP 染色、21 d 行礦化結(jié)節(jié)染色,倒置相差顯微鏡觀察染色結(jié)果;并于培養(yǎng)后7、14、21 d,檢測各組ALP 活性、骨鈣素(osteocalcin,OCN)水平,篩選 LEP 的最佳誘導濃度;B、E、F 組細胞培養(yǎng)7 d 后,采用 RT-PCR 檢測成骨相關基因:核心結(jié)合因子(core-binding factor α1,Cbfα1)、ALP、Col Ⅰ、OCN mRNA 的表達。 結(jié)果 誘導培養(yǎng)7 d,ALP 染色結(jié)果顯示,A、B、C、D、E 組細胞胞漿均呈藍色陽性著色,F(xiàn) 組呈弱陽性;誘導培養(yǎng)21 d,礦化結(jié)節(jié)染色結(jié)果顯示,A、B、C、D、E 組細胞染色呈陽性,F(xiàn) 組呈陰性。B 組培養(yǎng)后7、14、21 d,ALP、OCN 活性低于 E 組,但顯著高于其余各組,差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05),200 ng/mL LEP 為最佳濃度。B、E、F組細胞培養(yǎng)7 d,F(xiàn) 組Cbfα1、ALP、Col Ⅰ、OCN mRNA 均不表達;B、E 組各產(chǎn)物mRNA 均有表達,但B 組低于E 組。 結(jié)論 LEP 可促進 hBMSCs 成骨分化,其機制可能為LEP 促進了成骨相關基因的表達
引用本文: 徐俊昌,吳濤,鐘招明,趙成毅,湯勇智,陳建庭. 瘦素對hBMSCs 成骨分化的作用及機制研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(2): 140-144. doi: 復制