目的 探討自體BMSCs 與膠原膜復(fù)合構(gòu)建組織工程皮膚修復(fù)小型香豬全層皮膚缺損，為組織工程皮膚的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 取4 只貴州小型香豬骨髓各20 mL 培養(yǎng)BMSCs，傳至第3 代。取新鮮牛肌腱通過化學(xué)交聯(lián)的方法制備成直徑為5 cm 的圓形Ⅰ型膠原膜。將密度為2 × 107 個(gè)/mL 第3 代BMSCs 用DAPI 標(biāo)記后種植到Ⅰ型膠原膜上孵育24 h，制備組織工程皮膚。在豬背部正中線兩側(cè)分別由前向后切取5 個(gè)直徑5 cm、深達(dá)筋膜的圓形全層皮膚缺損創(chuàng)面，隨機(jī)分為兩組（n=10）。對(duì)照組行單純Ⅰ型膠原膜修復(fù)，實(shí)驗(yàn)組行組織工程皮膚修復(fù)。于術(shù)后3、8 周，觀察創(chuàng)面愈合情況，并取材行HE 染色及透射電鏡觀察，并于術(shù)后3 周對(duì)實(shí)驗(yàn)組行熒光顯微鏡及糖原染色觀察。 結(jié) 果 動(dòng)物均存活至實(shí)驗(yàn)完成。術(shù)后3 周對(duì)照組創(chuàng)面約40% 皮膚發(fā)黑、結(jié)痂、壞死，8 周時(shí)仍見壞死組織且瘢痕攣縮明顯；術(shù)后3 周實(shí)驗(yàn)組創(chuàng)面皮膚成活，無明顯瘢痕形成，8 周創(chuàng)面愈合良好；兩組創(chuàng)面愈合率差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）。組織學(xué)觀察：術(shù)后3 周對(duì)照組可見肉芽組織增生，無表皮層覆蓋；實(shí)驗(yàn)組具有良好的表皮和真皮結(jié)構(gòu)，糖原染色可見基底膜呈完整連續(xù)深紅染色。術(shù)后8 周兩組均形成正常皮膚樣結(jié)構(gòu)。透射電鏡觀察：術(shù)后3 周對(duì)照組真皮層有大量中性粒細(xì)胞和成纖維細(xì)胞，未見表皮超微結(jié)構(gòu)；實(shí)驗(yàn)組可見大量表皮細(xì)胞并以橋粒相連，表皮基底細(xì)胞與基膜以半橋粒連接；真皮層可見大量成纖維細(xì)胞，以及細(xì)胞外大量膠原微纖維沉積，可見內(nèi)皮細(xì)胞形成的毛細(xì)血管。術(shù)后3 周實(shí)驗(yàn)組熒光顯微鏡觀察，帶有DAPI 標(biāo)記的BMSCs 定位于重建的表皮和真皮組織中，表皮主要定位于基底膜附近，真皮層可見大量熒光標(biāo)記的BMSCs。 結(jié) 論 以自體BMSCs 為種子細(xì)胞與膠原膜復(fù)合構(gòu)建組織工程皮膚，可有效修復(fù)豬全層皮膚缺損，有望成為一種較理想的組織工程皮膚。
引用本文： 何麗娟,劉大慶,白慈賢,閆迎軍,管利東,裴雪濤. 自體BMSCs 復(fù)合膠原膜修復(fù)豬全層皮膚缺損. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(3): 348-352. doi: 復(fù)制