目的 對(duì)比研究單純骨軟骨鑲嵌成形術(shù)與聯(lián)合組織工程方法及聯(lián)合未轉(zhuǎn)染基因的BMSCs- 藻酸鈣修復(fù)急性骨軟骨缺損的效果。 方法 對(duì)攜帶hTGF-β1 的重組腺病毒轉(zhuǎn)染BMSCs(hTGF-β1 轉(zhuǎn)染組)、采用攜帶Lac-Z 報(bào)告基因的重組腺病毒(Adv-βgal)轉(zhuǎn)染BMSCs(Adv-βgal 轉(zhuǎn)染組)及未轉(zhuǎn)染BMSCs(未轉(zhuǎn)染空白對(duì)照組)進(jìn)行Westernblot 檢測(cè)hTGF-β1、Col Ⅱ及Aggrecan 表達(dá)。將雄性6 月齡崇明山羊18 只,體重22 ~ 25 kg,隨機(jī)分為A、B、C 組(n=6)。取B、C 組自體骨髓進(jìn)行BMSCs 分離、培養(yǎng),傳至第3 代。B 組細(xì)胞行hTGF-β1 重組腺病毒轉(zhuǎn)染。3 組動(dòng)物于雙后肢股骨內(nèi)髁負(fù)重區(qū)采用骨鉆制備直徑5 mm、長(zhǎng)3 mm 的缺損,A 組采用自體骨軟骨柱修復(fù);B 組修復(fù)材料同A 組,并同時(shí)將5 mL 轉(zhuǎn)染hTGF-β1 的BMSCs 藻酸鈉混合液注入空隙,加入CaCl2 產(chǎn)生凝膠;C 組:修復(fù)方法同B 組,采用未轉(zhuǎn)染hTGF-β1 的自體BMSCs 藻酸鈉混合液。術(shù)后觀察山羊一般情況,于術(shù)后12 周及24 周取材,行大體及組織學(xué)觀察,并參照O’ Driscoll,Keeley and Salter 組織形態(tài)學(xué)評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行評(píng)分;術(shù)后24 周行免疫組織化學(xué)及透射電鏡觀察。 結(jié)果 轉(zhuǎn)染后5 d,hTGF-β1 轉(zhuǎn)染組細(xì)胞hTGF-β1、Col Ⅱ及Aggrecan 表達(dá)均顯著強(qiáng)于Adv-βgal 轉(zhuǎn)染組及未轉(zhuǎn)染空白對(duì)照組。術(shù)后動(dòng)物均存活至實(shí)驗(yàn)完成,傷口Ⅰ期愈合。大體觀察B 組修復(fù)組織邊界模糊,移植修復(fù)區(qū)域表面光滑;A、C 組軟骨間空隙有裂隙存在。組織學(xué)觀察A 組軟骨間空隙區(qū)纖維軟骨樣組織修復(fù)、纖維組織填充或相鄰軟骨增生;B 組修復(fù)軟骨細(xì)胞排列規(guī)律,交界區(qū)整合良好;C 組軟骨間的空隙區(qū)見纖維軟骨樣組織,存在裂隙。各時(shí)間點(diǎn)B 組組織學(xué)評(píng)分均高于A、C 組,C 組高于A 組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05);B 組12 周與24 周差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。術(shù)后24 周免疫組織化學(xué)示B 組軟骨間修復(fù)組織染色以軟骨細(xì)胞和陷窩周圍明顯,A、C 組呈淡染。透射電鏡觀察示B 組修復(fù)組織可見典型軟骨細(xì)胞,A、C 組見平行或交錯(cuò)排列的膠原纖維束。 結(jié)論 骨軟骨鑲嵌成形術(shù)聯(lián)合組織工程方法可解決單純骨軟骨鑲嵌成形術(shù)殘留缺損愈合不良及軟骨間整合不良的問題。
引用本文: 孫駿,侯筱魁,李旭,湯亭亭,張如明,匡勇,史萌. 單純骨軟骨鑲嵌成形術(shù)與聯(lián)合組織工程方法治療急性骨軟骨缺損的對(duì)比研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2009, 23(4): 490-496. doi: 復(fù)制