目的 初步確立hBMSCs 的二維生物打印方法,實現(xiàn)對細胞噴射過程的控制并保持打印后細胞活力。 方法 取健康志愿者骨髓5 mL,常規(guī)培養(yǎng)hBMSCs 至第2 代,調整為1 × 106 個/mL 單細胞懸液。實驗分3 組:打印組1 細胞先行碘化丙啶(propidium iodide,PI)熒光標記,快速成型組織打印機進行二維細胞打印,x 軸間隔300 μm,y 軸間隔1 500 μm,激光共聚焦顯微鏡觀察。打印組2 細胞未行PI 標記,經生物打印后培養(yǎng)2 h,Live/Dead viability Kit 測定細胞活力,激光共聚焦顯微鏡觀察細胞熒光染色情況;取1 份未經Live/Dead viability Kit 測試的打印組2 細胞,培養(yǎng)7 d 后倒置顯微鏡觀察細胞形態(tài),貼壁后常規(guī)培養(yǎng),動態(tài)觀察細胞生長狀態(tài)。對照組除細胞懸液不行打印,其余操作同打印組2。 結果 打印組1 細胞激光共聚焦顯微鏡觀察,“細胞墨滴”在二維組織中規(guī)則且均勻分布,滿足二維設計細胞打印要求;每個“細胞墨滴”包含細胞15 ~ 35 個。打印組2 細胞經活力測試,細胞孵育30 min 后激光共聚焦顯微鏡觀察顯示細胞熒光染色情況。對照組細胞活力與打印組2 無明顯區(qū)別。打印后細胞常規(guī)培養(yǎng)7 d,細胞可正常貼壁生長,形態(tài)、生長狀態(tài)良好。 結論 通過生物打印技術可實現(xiàn)hBMSCs 在二維平面上的定向、定量規(guī)則分布,并為進一步的細胞三維打印乃至器官打印體系奠定基礎。
引用本文: 麻蓀香,柴崗,劉齊海,胡慶夕,周廣東,崔磊. hBMSCs 的生物打印初步研究. 中國修復重建外科雜志, 2009, 23(4): 497-500. doi: 復制