研究人脂肪干細胞（adipose derived stem cells，ADSCs）在體外單層培養(yǎng)條件下誘導為血管平滑肌細胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）的可行性。 方法 應用酶消化法消化人脂肪組織獲得ADSCs，基礎培養(yǎng)液培養(yǎng)傳代，取第1 代細胞用于誘導分化實驗。實驗分兩組，ADSCs 以含5 ng/mL TGF-β1 及50 ng/mL PDGF-BB 的M-199 誘導液聯(lián)合誘導，作為誘導組；以含10% FBS 的M-199 培養(yǎng)液培養(yǎng)ADSCs 作為未誘導組。鏡下觀察細胞生長情況；免疫熒光和RT-PCR 方法檢測平滑肌細胞特異標記的表達情況；流式細胞儀檢測誘導陽性率。 結果 誘導組細胞形態(tài)形成平滑肌細胞特有的“峰- 谷”生長模式，未誘導組細胞形態(tài)未發(fā)生改變，與原代ADSCs 相似呈成纖維細胞樣生長。誘導培養(yǎng)14 d，誘導組細胞體外擴增能力較未誘導組顯著降低（P lt; 0.01）。免疫熒光檢測：誘導組表達平滑肌特異標記α 平滑肌肌動蛋白（α-smooth muscle actin，α-SMA）、平滑肌肌球蛋白重鏈（smooth muscle-myosin heavy chain，SMMHC）和Calponin，未誘導組無表達。細胞誘導前α-SMA、SM-MHC及Calponin 陽性表達率分別為3.26% ± 1.31%、3.55% ±1.60%、4.02% ± 1.81%；誘導組陽性表達率分別為48.13% ± 8.31%、45.33% ± 10.68%、39.13% ± 9.42%；誘導前、后差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.01）。RT-PCR 檢測：誘導組表達平滑肌特異標記α-SMA、SM-MHC、Calponin 和SM-22α，未誘導組無表達。 結 論 脂肪干細胞經(jīng)體外培養(yǎng)及誘導后，呈明顯的VSMCs 特性，有可能成為血管組織工程新的種子細胞來源。
引用本文： 楊平,尹爍,崔磊,李宏,吳瑩琛,劉偉,曹誼林. 脂肪干細胞向血管平滑肌細胞誘導的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2008, 22(4): 481-486. doi: 復制
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