【摘 要】 目的 探討體外快速培養(yǎng)犬食管黏膜上皮細(xì)胞（esophageal mucosa epithelial cells，EMECs）及其與
SIS 體外復(fù)合培養(yǎng)的方法，為組織工程食管研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法 取2 ～ 5 周齡幼犬5 只，無菌獲取其食管組織，采
用混合酶消化法，分離培養(yǎng)EMECs，于倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，取第2 代細(xì)胞培養(yǎng)1 ～ 5 d 繪制生長(zhǎng)曲線并
進(jìn)行細(xì)胞表面標(biāo)志物細(xì)胞角蛋白19（cytokeratin 19，CK-19）檢測(cè)。取第2 代EMECs 與SIS 復(fù)合培養(yǎng)4、8 d，行形態(tài)學(xué)、
組織學(xué)及掃描電鏡觀察。 結(jié)果 倒置相差顯微鏡下EMSCs 呈典型鋪路石樣。CK-19 免疫組織化學(xué)染色可見細(xì)胞胞漿
呈陽性染色。MTT 法測(cè)定第2 代細(xì)胞在傳代培養(yǎng)2 d 生長(zhǎng)達(dá)高峰。EMECs 與SIS 復(fù)合培養(yǎng)4 d，細(xì)胞呈多角形，細(xì)胞間
連接緊密，呈鋪路石樣排列；SIS 表面形成1 ～ 2 層細(xì)胞組成的復(fù)層上皮樣結(jié)構(gòu)。8 d 時(shí)，細(xì)胞密度增大，SIS 表面形成2 ～ 3層細(xì)胞組成的復(fù)層上皮樣結(jié)構(gòu)；掃描電鏡見細(xì)胞在材料上已大量增長(zhǎng)，呈層狀排列。 結(jié)論 采用混合酶消化法，用含6%
FBS 的DKSFM 培養(yǎng)犬EMECs，方法簡(jiǎn)便，適合推廣應(yīng)用。SIS 與EMECs 有良好的相容性，可作為構(gòu)建組織工程食管的
理想支架材料。
引用本文： 譚波,魏人前,楊志明,李秀群,韓平,智偉,解慧琪. 食管黏膜上皮細(xì)胞與SIS 復(fù)合培養(yǎng)及生物學(xué)特性研究. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(6): 742-746. doi: 復(fù)制