目的 探討人椎間盤(pán)細(xì)胞和關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞的分子表型差異,分析hBMSCs 經(jīng)TGF-β3 和BMP-7 聯(lián)合誘導(dǎo)后能否分化為軟骨細(xì)胞和髓核細(xì)胞。 方法 取9 例自愿捐贈(zèng)者髂嵴骨髓20 ~ 40 mL 分離培養(yǎng)hBMSCs。取第4 代hBMSCs 行三維微球培養(yǎng)。根據(jù)基礎(chǔ)培養(yǎng)基中加入的生長(zhǎng)因子不同,實(shí)驗(yàn)分成 4 組,分別為加入10 ng/mL TGF-β3 組(A 組)、200 ng/mL BMP-7 組(B 組)、同時(shí)加入兩種生長(zhǎng)因子組(C 組)以及空白對(duì)照組(D 組)。于培養(yǎng)后21 d,行組織學(xué)及免疫組織化學(xué)觀察;于培養(yǎng)后4、21 d 進(jìn)行PCR 檢測(cè)Ⅰ、Ⅱ、Ⅹ型膠原、蛋白多糖和SOX9 基因的表達(dá)。 結(jié)果 培養(yǎng)后21 d,HE 染色示A 組和C 組細(xì)胞呈軟骨細(xì)胞樣形態(tài)特征,甲苯胺藍(lán)染色及免疫組織化學(xué)染色Ⅱ型膠原表達(dá)呈陽(yáng)性。B 組和D 組細(xì)胞形態(tài)無(wú)明顯改變,PCR 檢測(cè)示培養(yǎng)后21 d,A、C 組SOX9、蛋白多糖、Ⅰ型膠原及Ⅱ型膠原表達(dá)較4 d 時(shí)明顯增加(P lt; 0.05)。B、D 組Ⅰ型膠原表達(dá)較4 d 時(shí)明顯增加(P lt; 0.05),SOX9、蛋白多糖及Ⅱ型膠原較4 d 時(shí)無(wú)明顯變化(P gt;0.05)。其中僅A組Ⅹ型膠原表達(dá)呈陽(yáng)性。 結(jié)論 TGF-β3 和BMP-7 聯(lián)合應(yīng)用能促進(jìn)hBMSCs 分化更接近于椎間盤(pán)細(xì)胞,可能為椎間盤(pán)組織工程提供種子細(xì)胞。
引用本文: 豐干鈞,劉浩,陳曉禾,李秀群,趙獻(xiàn)峰,梁濤. hBMSCs 誘導(dǎo)分化類(lèi)髓核細(xì)胞. 中國(guó)修復(fù)重建外科雜志, 2008, 22(12): 1470-1475. doi: 復(fù)制