目的 探討青蒿琥酯(artesunate,Art)誘導皮膚瘢痕成纖維細胞凋亡的作用及機制。 方法 取自愿捐獻的人耳垂增生性瘢痕,采用組織塊貼壁法進行細胞培養(yǎng)。經免疫組織化學染色鑒定后,取第3~5代成纖維細胞,采用含60、120和240 mg/L Art培養(yǎng)液各5 ml培養(yǎng)作為實驗組,僅加入等量的培養(yǎng)液作為對照組。于倒置顯微鏡及透射電鏡觀察,采用流式細胞儀觀察細胞凋亡及細胞周期。另取第3~5代成纖維細胞,實驗組采用30、60和120 mg/L Art培養(yǎng)液,對照組僅加入等量的培養(yǎng)液,觀察細胞內鈣離子的變化。 結果 原代成纖維細胞呈典型的梭形貼壁生長,免疫組織化學鑒定細胞波形蛋白呈陽性表達;倒置顯微鏡下觀察Art在60~240 mg/L濃度范圍內抑制成纖維細胞生長且呈劑量及時間依賴性,細胞出現凋亡征象;透射電鏡觀察,各實驗組出現染色質濃縮,沿著核膜排列,甚至核碎裂現象。細胞周期分析顯示各實驗組與對照組比較,凋亡細胞比例、處于G0~G1、S、G2~M期細胞數差異均有統計學意義(P<0.05),實驗組均出現典型的凋亡峰,且隨藥物濃度增加,峰值越大。Art在30~120 mg/L作用成纖維細胞 24 h可引起細胞內鈣離子濃度持續(xù)增加,與對照組比較,差異有統計學意義(P<0.05)。 結論 Art通過作用于成纖維細胞周期誘導細胞凋亡,細胞內鈣離子濃度升高可能是其誘導成纖維細胞凋亡的機制之一。
引用本文: 孔恒,余清聲,朱柳,袁牧,王肅生,冀航,張志華,梁剛,黃宗海. 青蒿琥酯誘導瘢痕成纖維細胞凋亡的實驗研究. 中國修復重建外科雜志, 2007, 21(9): 970-974. doi: 復制