目的 研究組織工程骨體外構(gòu)建過程中,成骨細胞與生物衍生骨相互作用的基因表達。方法用人胚骨膜來源的成骨細胞與生物衍生骨體外復(fù)合培養(yǎng)構(gòu)建組織工程骨。培養(yǎng)2、4、6、8和10 d,分別提取總RNA,經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。用熒光及TaqMan探針行實時定量PCR,分別擴增成骨細胞特異轉(zhuǎn)錄因子(Cbfa1)、成骨細胞特異基因(Osterix)、Ⅰ型膠原、骨鈣素(osteocalcin,OC)和整合素α5和β1(Integrin α5 and β1),讀取擴增循環(huán)數(shù)(Ct值),進行統(tǒng)計學(xué)分析。以單純培養(yǎng)的成骨細胞作為對照組。 結(jié)果 Cbfa1與Osterix變化一致,其中實驗組Osterix在2 d和 8 d的表達均明顯高于對照組(P<0.05)。Ⅰ型膠原與OC的表達變化一致,實驗組除10 d時,其余各時間段Ⅰ型膠原表達均明顯低于對照組(P<0.01)。Intgerin的表達始終處于較高水平,在培養(yǎng)最初的2 d,實驗組Integrin β1表達明顯高于對照組(P<0.01)。結(jié)論 成骨細胞與生物衍生材料復(fù)合后,重要基因可持續(xù)正常表達。作為支架材料,生物衍生骨在保持成骨細胞性狀、誘導(dǎo)及促進成骨細胞分化方面有明顯優(yōu)越性;它不僅對細胞順利進入增殖狀態(tài)無影響,而且為細胞增殖提供廣闊而有效的空間。成骨細胞最終可良好分化,充分發(fā)揮成骨功能,并有利于成骨細胞黏附,黏附行為貫穿細胞與材料相互作用的整個過程,而并非局限于開始階段。
引用本文: 祁潔,楊志明,解慧琪,李秀群. 成骨細胞與生物衍生支架材料相互作用的基因表達研究. 中國修復(fù)重建外科雜志, 2005, 19(7): 563-568. doi: 復(fù)制