目的 觀察肽聚糖（PGN）對(duì)樹(shù)突細(xì)胞（DCs）分泌促炎性細(xì)胞因子的影響以及對(duì)實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）輔助性T細(xì)胞（Th）17（Th17細(xì)胞）反應(yīng)的調(diào)控。方法 利用粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子、白細(xì)胞介素（IL）-4（IL-4）定向誘導(dǎo)健康小鼠骨髓細(xì)胞向DCs分化。誘導(dǎo)分化的第6天將DCs分為對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)組，實(shí)驗(yàn)組加入PGN干預(yù)，對(duì)照組加入等量無(wú)菌磷酸緩沖鹽溶液，培養(yǎng)24 h后利用實(shí)時(shí)熒光逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）技術(shù)，檢測(cè)2組培養(yǎng)細(xì)胞中Th17細(xì)胞分化相關(guān)的細(xì)胞因子IL23、腫瘤壞死因子- alpha;（TNF- alpha;）、IL-6、IL-1 beta; mRNA相對(duì)表達(dá)量。采用光感受器間維生素A類(lèi)結(jié)合蛋白（IRBP）1-20多肽片段（IRBP1-20）和弗氏不完全佐劑及結(jié)核分枝桿菌H37RA免疫C57BL/6小鼠。免疫后13 d分離EAU模型鼠脾臟和淋巴結(jié)的IRBP1-20特異的T細(xì)胞與經(jīng)PGN干預(yù)或未干預(yù)的DCs共培養(yǎng)。收集共培養(yǎng)后2 d的細(xì)胞，實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)維甲酸相關(guān)孤兒受體 gamma;t（ROR gamma;t）、IL-17、T-bet、 gamma;干擾素（IFN- gamma;） mRNA相對(duì)表達(dá)量；此外，收集共培養(yǎng)后2、5、7 d的細(xì)胞分別進(jìn)行流式細(xì)胞儀分析，觀察Th17、Th1細(xì)胞的變化。結(jié)果 實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)結(jié)果顯示，實(shí)驗(yàn)組DCs經(jīng)PGN干預(yù)后IL-23、IL-1 beta;、IL-6、TNF- alpha; mRNA相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=-14.363、-5.627、-3.85、-28.151；P＜0.05）；實(shí)驗(yàn)組ROR gamma;t、IL-17 mRNA相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組顯著升高（t=-5.601、-19.76；P＜0.05），而T-bet、IFN- gamma; mRNA相對(duì)表達(dá)量較對(duì)照組顯著降低（t=4.717、11.207；P＜0.05）。流式細(xì)胞儀檢測(cè)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，實(shí)驗(yàn)組的DCs與T細(xì)胞共培養(yǎng)后2、5、7 d，IL-17+細(xì)胞的百分比升高（t=-2.944、-3.03、-4.81；P＜0.05），而IFN- gamma;+細(xì)胞的比例變化不大（t=-1.25、-0.18、-2.16；P＞0.05）。結(jié)論 PGN能夠刺激DCs分泌IL-23、TNF- alpha;、IL-6及IL-1 beta;等Th17細(xì)胞分化相關(guān)的細(xì)胞因子，促進(jìn)EAU中Th17細(xì)胞的分化和增生。
引用本文： 肖青,粘紅,魏瑞華,張曉敏,李雪,劉勛,李筱榮. 肽聚糖對(duì)樹(shù)突細(xì)胞分泌促炎性細(xì)胞因子以及實(shí)驗(yàn)性自身免疫性葡萄膜炎輔助性T細(xì)胞17的影響. 中華眼底病雜志, 2013, 29(6): 600-604. doi: 復(fù)制
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