目的 建立成年兔視網膜M uuml;ller細胞體外原代培養(yǎng)方法。方法 運用組織塊培養(yǎng)法。分離出成年兔視網膜神經感覺層,剪成1 mm times;1 mm大小組織塊,置于含有20%胎牛血清的Dulbecco改良Eagle培養(yǎng)液/F12培養(yǎng),采用倒置相差顯微鏡、透射電子顯微鏡觀察及熒光免疫組織化學染色的方法進行培養(yǎng)細胞的鑒定。結果 培養(yǎng)的細胞塊3 d后可見部分細胞突起長出,7 d后整個組織塊周圍放射狀長出較多細胞。倒置相差顯微鏡下,培養(yǎng)細胞呈一端細胞體豐富膨大,另一端有一長突起,細胞核橢圓形,常有2個或2個以上核仁;透射電子顯微鏡下,細胞胞體大,細胞漿豐富,內含豐富的8~10 nm的微絲。熒光免疫組織化學法顯示細胞呈神經膠質纖維酸性蛋白和胞內視黃醛結合蛋白陽性,陽性率達95%以上。結論 運用組織塊培養(yǎng)法可培養(yǎng)出兔視網膜M uuml;ller細胞。
引用本文: 過貴元,胡淑鸞. 兔視網膜Müller細胞原代培養(yǎng). 中華眼底病雜志, 2011, 27(2): 167-169. doi: 復制
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