目的 研究視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)細(xì)胞中增生細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)表達(dá)及其反義寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides,ASODN)對其表達(dá)和細(xì)胞增生的抑制作用,為增生性玻璃體視網(wǎng)膜病變(proliferative vitreoretinopathy,PVR)治療探索基因治療新途徑。 方法 (1)體外培養(yǎng)兔眼RPE細(xì)胞,在不同時間采用鏈霉親合素-生物素化過氧化物酶復(fù)合物(streptoavidin-biotinenzyme complex,SABC)免疫組織化學(xué)法檢測PCNA的表達(dá);(2)脂質(zhì)體介導(dǎo)下不同濃度的PCNA AS-ODN和正義寡核苷酸(sense oligodeoxynucleotides,S-ODN)分別作用于體外培養(yǎng)的RPE細(xì)胞,采用免疫組織化學(xué)方法檢測PCNA的表達(dá);(3)四唑鹽比色法(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)檢測在不同濃度的PCNA AS-ODN和S-ODN作用下RPE細(xì)胞生長活性及其生長抑制率。 結(jié)果 (1)體外培養(yǎng)兔眼RPE細(xì)胞表達(dá)PCNA,表達(dá)高峰為培養(yǎng)后48 h ;(2)在0.28、1.12 μmol/L AS-ODN 作用下,PCNA的表達(dá)明顯受抑制;(3)0.28、1.12 μmol/L的PCNA AS-ODN 能明顯抑制RPE細(xì)胞增生活性,并呈劑量依賴性,其生長抑制率分別達(dá)53%、81%。 結(jié)論 一定濃度PCNA AS-ODN能序列特異性地抑制RPE細(xì)胞PCNA表達(dá)和增生活性,有望進(jìn)一步用于PVR的治療實(shí)驗(yàn)研究。 (中華眼底病雜志, 2002, 18: 231-233)
引用本文: 陳建斌,曾水清,徐莉莉. 增生細(xì)胞核抗原在視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞表達(dá)及其反義寡核苷酸的抑制作用. 中華眼底病雜志, 2002, 18(3): 231-233. doi: 復(fù)制
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