楊盛家 1 , 陳兵 1 , 佟鑄 1 , 張淑文 2 , 史小林 3 , 許晴 3 , 張斌 1 , 張建 1
  • 1.首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院血管外科（北京 100034）;;
  • 2.首都醫(yī)科大學(xué)宣武醫(yī)院再生醫(yī)學(xué)實驗室（北京 100034）;;
  • 3.首都醫(yī)科大學(xué)解剖組織與胚胎教研室（北京 100034）;

目的 　利用細(xì)胞示蹤技術(shù)探討骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）治療慢性后肢缺血的相關(guān)機理。
方法 　采用密度梯度離心法結(jié)合直接貼壁法分離和培養(yǎng)大鼠MSCs，并以5-溴脫氧尿嘧啶核苷（BrdU）標(biāo)記。采用線栓法制備8只Lewis大鼠慢性后肢缺血模型，將其隨機均分為MSCs移植組和對照組，分別于患側(cè)后肢肌肉注射MSCs和生理鹽水。分別于移植術(shù)后第7天和第14天，對其進行臨床觀察、后肢血流量測定及后肢血管造影，再于相應(yīng)時間點處死大鼠，取患側(cè)后肢股四頭肌和腓腸肌，行HE染色及BrdU免疫組化染色。
結(jié)果 　移植術(shù)后14d，8只大鼠全部成活，移植部位均無壞死和腫瘤形成；MSCs移植組大鼠患側(cè)/健側(cè)后肢的血流灌注比值明顯增高（1.773比1.279），而血管造影結(jié)果提示2組大鼠的側(cè)支血管數(shù)量比值未見顯著增加（0.908比0.835）。HE染色結(jié)果示2組大鼠的股四頭肌及腓腸肌并未發(fā)生特殊的病理學(xué)變化。BrdU免疫組化結(jié)果顯示，陽性顆粒定位為股四頭肌及腓腸肌的間質(zhì)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞；且MSCs的分布存在差異，移植術(shù)后7d腓腸肌內(nèi)陽性細(xì)胞所占比例明顯高于股四頭肌，而14d時則相反。
結(jié)論 　MSCs移植在術(shù)后早期可以提高血流灌注量，但這并非為增加了側(cè)支血管數(shù)量使然，MSCs移植后所引起的旁分泌效應(yīng)可能在術(shù)后早期起著重要的作用。

引用本文： 楊盛家,陳兵,佟鑄,張淑文,史小林,許晴,張斌,張建. 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞治療慢性后肢缺血機理的初步研究△. 中國普外基礎(chǔ)與臨床雜志, 2013, 20(6): 608-614. doi: 復(fù)制

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