• 1. 安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院器官移植中心（安徽合肥 230022）;;
  • 2. 香港中文大學(xué)威爾斯親王醫(yī)院病理解剖及細(xì)胞學(xué)系（中國(guó)香港）;

目的 　評(píng)估外周血漿DNA甲基化檢測(cè)在肝細(xì)胞肝癌（HCC）診斷中的作用，篩選血漿靈敏度及特異性高的甲基化抑癌基因。
方法 　采用甲基化特異性PCR （MSP）檢測(cè)34例經(jīng)病理檢查證實(shí)的HCC患者血漿及其配對(duì)癌組織中的SLIT2及DAPK基因啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)，并分析其與HCC臨床病理特征的關(guān)系。
結(jié)果 　34例HCC患者癌組織中SLIT2和DAPK基因甲基化率分別為70.6% （24/34）和79.4%（27/34），相應(yīng)外周血漿中SLIT2和DAPK基因甲基化率分別為44.1%?（15/34）和50.0% （17/34）。血漿SLIT2和DAPK基因甲基化檢測(cè)的靈敏度分別為62.5%和63.0%，特異度均為100%，陰性預(yù)測(cè)值分別為52.6%和41.2%，陽(yáng)性預(yù)測(cè)值均為100%。HCC癌組織和外周血漿中SLIT2及DAPK甲基化檢出率與HCC各臨床病理特征無(wú)關(guān)（P＞0.05）。在AFP＜400μg/L患者中SLIT2和DAPK基因甲基化聯(lián)合檢出率達(dá)61.1% （11/18）。
結(jié)論 　基于MSP方法，血漿中SLIT2及DAPK基因甲基化仍有較高的檢出率，HCC癌組織和血漿中SLIT2及DAPK基因甲基化具有明顯的一致性。 血漿DNA甲基化可作為一種獨(dú)立非侵入性診斷HCC的標(biāo)志物，尤其對(duì)AFP陰性者可提高HCC的診斷率。 HBV感染可能僅與部分抑癌基因甲基化相關(guān)。

引用本文： 王平,耿小平,朱立新,李曉明,李棟. 肝細(xì)胞肝癌中外周血漿DNA 基因甲基化檢測(cè)及意義. 中國(guó)普外基礎(chǔ)與臨床雜志, 2012, 19(7): 727-732. doi: 復(fù)制

1. Gautschi O， Bigosch C， Huegli B， et al. Circulating deoxyribonucleic acid as prognostic mark in non-small-cell lung cancer patients undergoing chemotherapy [J]. J Clin Oncol， 2004，22(20)：4157-4164.
2. Schlechte HH， Stelzer C， Weickmann S， et al. TP53 gene in blood plasma DNA of tumor patients [J]. Ann NY Acad Sci，2004， 1022(6)：61-69.
3. Mandel P， Metais P. Les acides nucleiques du plasma sanguin chez l’homme [J]. CR Acad Sci Paris， 1948， 142：241-243.
4. Leon SA， Shapiro B， Sklarof DM， et a1. Free DNA in the serum of cancer patients and the efect of thempy [J]. Cancer Res，1977， 37(3)： 646-650．.
5. Vaart MVD， Pretorius PJ. Is the role of circulating DNA as a biomarker of cancer being prematurely overrated? [J]. Clinical Biochemistry， 2010， 43(1)： 26-36.
6. 黃朝暉， 胡瑜， 華東， 等. 定量PCR 檢測(cè)肝細(xì)胞癌患者循環(huán)血漿DNA 及其臨床意義 [J]. 中國(guó)癌癥雜志， 2010， 20(9)：663-667.
7. Jackson PE， Qian GS， Friesen MD， et al. Specific p53 mutations detection in plasma and tumors of hepatocellular carcinoma patients by electrospray ionization mass spectrometry [J]. Cancer Res， 2001， 61(1)：33-35.
8. Chang YC， Ho CL， Chen HHW， et al. Molecular diagnosis of primary liver cancer by microsatellite DNA analysis in the serum [J]. Brit J Cancer， 2002， 87(12)： 1449-1453.
9. Board RE， Williams VS， Knight L， et al. Isolation and extraction of circulating tumor DNA from patients with small cell lung cancer [J]. Ann NY Acad Sci， 2008， 1137(8)： 98-107.
10. Chan KC， Yeung SW， Lui WB， et al. Effects of preanalytical factors on the molecular size of cell-free DNA in blood [J]. Clin Chem， 2005， 51(4)：781-784.
11. Thierry AR， Mouliere F， Gongora C， et al. Origin and quantification of circulating DNA in mice with human colorectal cancer xenografts [J]. Nucleic Acids Res， 2010， 38(18)： 6159-6175.
12. 張敬杰， 歐陽(yáng)濤， 萬(wàn)文徽， 等. 乳腺癌患者外周血漿中游離的腫瘤相關(guān)DNA 檢測(cè)及其臨床價(jià)值 [J]. 中華腫瘤雜志， 2007，29(8)： 609-613.
13. Iyer P， Zekri AR， Hung CW， et al. Concordance of DNA methylation pattern in plasma and tumor DNA of Egyptian hepatocellular carcinoma patients [J]. Exp Mol Pathol， 2010， 88(1)：107-111.
14. Wong IH， Lo YM， Zhang J ， et al. Detection of aberrant p16 methylation in the plasma and serum of liver cancer patients [J].Cancer Res， 1999， 59(1)： 71-73.
15. An Q， Liu Y， Gao Y， et al. Detection of p16 hypermethylation in circulating plasma DNA of non-small cell lung cancer patients [J]. Cance Lett， 2002， 188(1)： 109-114.
16. Fujiwara K， Fujimoto N， Tabata M， et al. Identification of epigenetic aberrant promoter methylation in serum DNA is useful for early detection of lung cancer [J]. Clin Cancer Res， 2005，11(3)： 1219-1225.
17. Chang H， Yi B， Li L， et al. Methylation of tumor associated genes in tissue and plasma samples from liver disease patients [J]. Exp Mol Pathol， 2008， 85(2)： 96-100.
18. Leerapun A， Suravarapu SV， Bida JP， et al. The utility of lens culinaris agglutinin reactive alpha-fetoprotein in the diagnosis of hepatocellular carcinoma：evaluation in a United States referral population [J]. Clin Gastroenterol Hepatol， 2007， 5(3)： 394-402．.
19. Nakagawa T， Seki T， Shiro T， et al. Clinicopathologic significance of protein induced vitamin K absence or antagonist Ⅱ and alpha-fetoprotein in hepatocellular carcinoma [J]． Int J Oncol，1999， 14(2) ： 281-286.
20. Nishida N， Nagasaka T， Nishimura T， et al. Aberrant methylation of multiple tumor suppressor genes in aging liver， chronic hepatitis， and hepatocellular carcinoma [J]. Hepatology，2008， 47(3)： 908-918.
21. Shim YH， Yoon GS， Choi HJ， et al. p16 Hypermethylation in the early stage of hepatitis B virus associatedhepatocarcinogenesis [J]. Cancer Lett， 2003， 190(2)： 213-219.
  1. 1. Gautschi O， Bigosch C， Huegli B， et al. Circulating deoxyribonucleic acid as prognostic mark in non-small-cell lung cancer patients undergoing chemotherapy [J]. J Clin Oncol， 2004，22(20)：4157-4164.
  2. 2. Schlechte HH， Stelzer C， Weickmann S， et al. TP53 gene in blood plasma DNA of tumor patients [J]. Ann NY Acad Sci，2004， 1022(6)：61-69.
  3. 3. Mandel P， Metais P. Les acides nucleiques du plasma sanguin chez l’homme [J]. CR Acad Sci Paris， 1948， 142：241-243.
  4. 4. Leon SA， Shapiro B， Sklarof DM， et a1. Free DNA in the serum of cancer patients and the efect of thempy [J]. Cancer Res，1977， 37(3)： 646-650．.
  5. 5. Vaart MVD， Pretorius PJ. Is the role of circulating DNA as a biomarker of cancer being prematurely overrated? [J]. Clinical Biochemistry， 2010， 43(1)： 26-36.
  6. 6. 黃朝暉， 胡瑜， 華東， 等. 定量PCR 檢測(cè)肝細(xì)胞癌患者循環(huán)血漿DNA 及其臨床意義 [J]. 中國(guó)癌癥雜志， 2010， 20(9)：663-667.
  7. 7. Jackson PE， Qian GS， Friesen MD， et al. Specific p53 mutations detection in plasma and tumors of hepatocellular carcinoma patients by electrospray ionization mass spectrometry [J]. Cancer Res， 2001， 61(1)：33-35.
  8. 8. Chang YC， Ho CL， Chen HHW， et al. Molecular diagnosis of primary liver cancer by microsatellite DNA analysis in the serum [J]. Brit J Cancer， 2002， 87(12)： 1449-1453.
  9. 9. Board RE， Williams VS， Knight L， et al. Isolation and extraction of circulating tumor DNA from patients with small cell lung cancer [J]. Ann NY Acad Sci， 2008， 1137(8)： 98-107.
  10. 10. Chan KC， Yeung SW， Lui WB， et al. Effects of preanalytical factors on the molecular size of cell-free DNA in blood [J]. Clin Chem， 2005， 51(4)：781-784.
  11. 11. Thierry AR， Mouliere F， Gongora C， et al. Origin and quantification of circulating DNA in mice with human colorectal cancer xenografts [J]. Nucleic Acids Res， 2010， 38(18)： 6159-6175.
  12. 12. 張敬杰， 歐陽(yáng)濤， 萬(wàn)文徽， 等. 乳腺癌患者外周血漿中游離的腫瘤相關(guān)DNA 檢測(cè)及其臨床價(jià)值 [J]. 中華腫瘤雜志， 2007，29(8)： 609-613.
  13. 13. Iyer P， Zekri AR， Hung CW， et al. Concordance of DNA methylation pattern in plasma and tumor DNA of Egyptian hepatocellular carcinoma patients [J]. Exp Mol Pathol， 2010， 88(1)：107-111.
  14. 14. Wong IH， Lo YM， Zhang J ， et al. Detection of aberrant p16 methylation in the plasma and serum of liver cancer patients [J].Cancer Res， 1999， 59(1)： 71-73.
  15. 15. An Q， Liu Y， Gao Y， et al. Detection of p16 hypermethylation in circulating plasma DNA of non-small cell lung cancer patients [J]. Cance Lett， 2002， 188(1)： 109-114.
  16. 16. Fujiwara K， Fujimoto N， Tabata M， et al. Identification of epigenetic aberrant promoter methylation in serum DNA is useful for early detection of lung cancer [J]. Clin Cancer Res， 2005，11(3)： 1219-1225.
  17. 17. Chang H， Yi B， Li L， et al. Methylation of tumor associated genes in tissue and plasma samples from liver disease patients [J]. Exp Mol Pathol， 2008， 85(2)： 96-100.
  18. 18. Leerapun A， Suravarapu SV， Bida JP， et al. The utility of lens culinaris agglutinin reactive alpha-fetoprotein in the diagnosis of hepatocellular carcinoma：evaluation in a United States referral population [J]. Clin Gastroenterol Hepatol， 2007， 5(3)： 394-402．.
  19. 19. Nakagawa T， Seki T， Shiro T， et al. Clinicopathologic significance of protein induced vitamin K absence or antagonist Ⅱ and alpha-fetoprotein in hepatocellular carcinoma [J]． Int J Oncol，1999， 14(2) ： 281-286.
  20. 20. Nishida N， Nagasaka T， Nishimura T， et al. Aberrant methylation of multiple tumor suppressor genes in aging liver， chronic hepatitis， and hepatocellular carcinoma [J]. Hepatology，2008， 47(3)： 908-918.
  21. 21. Shim YH， Yoon GS， Choi HJ， et al. p16 Hypermethylation in the early stage of hepatitis B virus associatedhepatocarcinogenesis [J]. Cancer Lett， 2003， 190(2)： 213-219.