四氯化碳復(fù)制大鼠肝硬變模型，通過大鼠肝臟缺血再灌注損傷模型，比較硬變肝與正常肝在缺血再灌注損傷時(shí)的差異和意義。結(jié)果顯示：肝硬變時(shí)對(duì)缺血再灌注損傷反應(yīng)與正常大鼠不同，再灌注時(shí)肝臟一氧化氮合成釋放顯著增加，肝組織ATP含量明顯降低且長(zhǎng)時(shí)間難以恢復(fù)等，可能是肝硬變時(shí)對(duì)缺血再灌注損傷更敏感、更易發(fā)生肝功能衰竭的重要原因。
目的 探討線粒體三磷酸腺苷敏感性鉀通道(mitoKATP)在未成熟心肌預(yù)處理保護(hù)中的作用，為未成熟心肌的保護(hù)提供依據(jù)。 方法 采用Langendorff離體心臟灌注模型，將24只新生(出生14～21 d)日本長(zhǎng)耳大白兔按隨機(jī)數(shù)字表法分為4組：缺血/再灌注組（I/R組），心臟缺血預(yù)處理組(E1組)，mitoKATP阻滯劑5-hydroxydecanoate(5HD) +心臟缺血預(yù)處理(E2組)， mitoKATP通道開放劑Diazoxide(Diaz)預(yù)處理組（E3組）；檢測(cè)心臟功能恢復(fù)率、心肌含水量、血清肌酸激酶和乳酸脫氫酶漏出率、三磷酸腺苷(ATP)含量、超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量、心肌線粒體Ca2+含量、心肌線粒體Ca2+-三磷酸腺苷酶活性(Ca2+-ATPase)、心肌線粒體合成ATP的能力；電子顯微鏡觀察心肌超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果 E1組、E3組心功能恢復(fù)優(yōu)于I/R組和E2組，心肌含水量低于I/R組和E2組(Plt;0.05)；E1組、E3組三磷酸腺苷含量、超氧化物歧化酶活性、心肌線粒體Ca2+-ATPase活性、心肌線粒體合成ATP的能力均優(yōu)于I/R組和E2組(Plt;0.05)，丙二醛含量、血清肌酸激酶和乳酸脫氫酶漏出率、心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2+含量、心肌線粒體Ca2+含量低于I/R 組、E2組(Plt;0.05)；E1組、E3組心肌超微結(jié)構(gòu)損傷較I/R組和E2組明顯減輕。 結(jié)論 心肌缺血預(yù)處理對(duì)未成熟心肌具有明顯的保護(hù)作用，其機(jī)制可能是通過mitoK-ATP通道的開放起作用。
目的 探討心肌細(xì)胞內(nèi)三磷酸腺苷酶（ATPase）的變化在鈍性胸部創(chuàng)傷（BCT）后心功能障礙發(fā)生機(jī)制中的意義。 方法 采用隨機(jī)數(shù)字表法將36只兔分為6組：正常對(duì)照組(創(chuàng)傷前)，傷后2 h、4 h、8 h、12 h和24 h組，每組6只。用BIM Ⅱ型生物撞擊機(jī)建立BCT模型，經(jīng)右頸總動(dòng)脈插管至左心室測(cè)左室壓力，在創(chuàng)傷后2 h、4 h、8 h、12 h和24 h各時(shí)間點(diǎn)測(cè)定血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)和心肌勻漿組織、線粒體及胞漿內(nèi)ATPase活性。 結(jié)果 與對(duì)照組比較，創(chuàng)傷后2 h時(shí)2 h組左心室收縮期末壓（LVESP）、左心室內(nèi)壓最大上升速率（+dp/dtmax）、等容收縮壓（IP）、實(shí)測(cè)心肌最大收縮速度（Vpm）明顯下降(Plt;0.05)，在傷后4~12 h時(shí)4 h組、8 h組、12 h組恢復(fù)至創(chuàng)傷前水平（Pgt;0.05）；等容舒張期左室內(nèi)壓下降時(shí)間常數(shù)（T）、左心室舒張期末壓（LVEDP）、左室內(nèi)壓最大下降速率（-dp/dtmax）在傷后24 h組與對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt;0.05,0.01）。傷后2 h組、4 h組心肌勻漿組織、線粒體及胞漿ATPase活性下降（Plt;0.05, 0.01），分別至傷后8～12 h時(shí)分別恢復(fù)至創(chuàng)傷前水平（Pgt;0.05）。相關(guān)分析表明：LVEDP和-dp/dtmax與心肌勻漿組織Na+-K+-ATPase活性改變呈明顯負(fù)相關(guān)（r=-0.674，-0.691，Plt;0.05），與Ca 2+-ATPase活性改變呈明顯負(fù)相關(guān)（r=-0.613，-0.642，Plt;0.05）；與心肌細(xì)胞線粒體Na+-K+-ATPase活性改變呈明顯負(fù)相關(guān)（r=-0. 622，-0. 616，Plt;0.05）；與心肌細(xì)胞胞漿Ca2+-ATPase活性改變呈明顯負(fù)相關(guān)（r=-0.672，-0.658，Plt;0.05），與心肌細(xì)胞胞漿Na+-K+-ATPase活性改變呈明顯負(fù)相關(guān)（r=-0.627，-0.632，Plt;0.05），與心肌細(xì)胞胞漿Mg2+-ATPase活性改變呈明顯負(fù)相關(guān)（r=-0.677，-0.661，Plt;0.05）。 結(jié)論 BCT后左心室收縮/舒張功能受到損害，尤以舒張功能障礙為主，心肌細(xì)胞中ATPase活性下降可能是其原因之一。
目的 觀察U 50 488H 預(yù)處理及低溫保存對(duì)離體兔心的保護(hù)作用?！》椒ā?0 只大白兔均分為5 組,每組8 只。通過L angendo rff 裝置建立離體心臟灌注模型, 對(duì)照組: 不用藥物進(jìn)行預(yù)處理, 用UW 液保存心臟6h; 組I :用含U 50 488H (1. 6mmo louml;L ) 的St. ThomasII 心臟停搏液預(yù)處理, 離體心臟低溫保存4h; 組II : 預(yù)處理同組I , 低溫保存6h; 組III : 預(yù)處理同組I , 低溫保存8h; I組V : 預(yù)處理同組I , 低溫保存10h。離體心臟在再灌注30min 后檢測(cè)心功能、心肌肌漿網(wǎng)鈣離子三磷酸腺苷酶(SRCa2+ -A TPase) 活性和心肌線粒體Ca2+ 濃度?！〗Y(jié)果 隨著離體心臟低溫保存時(shí)間的延長(zhǎng), 心功能各項(xiàng)指標(biāo)的恢復(fù)率、冠狀動(dòng)脈流量(Cf) 的恢復(fù)率和SRCa2+ -A TPase 的活性呈下降趨勢(shì), 而線粒體Ca2+ 濃度隨著心臟低溫保存時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸升高。組I 和組II 上述心功能指標(biāo)恢復(fù)率分別高于組III和組VI(P lt; 0.05, 0. 01) , 組III 恢復(fù)率高于組IV (P lt; 0. 05)。組II Cf 的恢復(fù)率(84. 56%±10. 38%) 高于組III (79. 45%±9. 67%)、組IV (68. 31%±6. 84% , P lt; 0. 01) , 組III 高于組IV (P lt; 0. 05)。組II SRCa2+ -A TPase 的活性(4.43±0. 41μmo l/mg?h) 分別高于對(duì)照組(3. 04±0. 22μmo l/m g?h)、組III (3. 26±0. 29μmo l/m g ?h ) 和組IV (2. 57±0.63μmo l/m g ?h, P lt;0.05) , 組III 高于組IV(P lt; 0. 01)。組II 線粒體Ca2+ 濃度(38. 76±4. 30μmo l/g ?dw ) 和對(duì)照組(40. 23±3. 75μmo l/g?dw ) 分別低于組III (43. 25±5. 16μmo l/g?dw ) 和組IV (45. 78±3. 26μmo l/g ?dw , P lt; 0. 05, 0. 01)。 結(jié)論 U 50 488H預(yù)處理及U 50 488H 保存液對(duì)離體供心的低溫保存時(shí)間應(yīng)控制在8h 以內(nèi);UW 液對(duì)離體心臟的保存作用與U 50 488H預(yù)處理及低溫保存6h 效果相當(dāng)。
目的 探討缺血后處理（IPo）的心肌保護(hù)作用及與心肌線粒體三磷酸腺苷（ATP）敏感性鉀通道(mitoKATP)的關(guān)系，為藥物后處理的研發(fā)提供依據(jù)。 方法 40只Wistar大鼠，建立大鼠離體心臟Langendorff灌注模型，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為5組，每組8只，正常對(duì)照組（NC組）：用K-H液持續(xù)灌注100 min，不做任何處理；缺血-再灌注（I/R）組：全心缺血40 min，再灌注60 min；IPo組：全心缺血40 min，再灌注10 s，缺血10 s，反復(fù)6次，然后持續(xù)再灌注58 min；5-羥基癸酸（5-HD）組：全心缺血40 min后，先用含5-HD(100 μmol/L)的KH液再灌注15 min，再用不含5-HD的K-H液再灌注45 min；IPo+5-HD組：全心缺血40 min后，先用含5-HD（100 μmol/L）的K-H液再灌注10 s，缺血10 s，反復(fù)6次，再用含5-HD的K-H液持續(xù)灌注13 min，然后用不含5-HD的K-H液再灌注45 min。觀察比較各組心功能、冠狀動(dòng)脈流量（CF）、冠狀動(dòng)脈流出液中心肌肌鈣蛋白I（cTnI）含量、心肌梗死（AMI）面積和心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)改變。 結(jié)果 再灌注末IPo組左心室發(fā)展壓（74.3±3.3 mm Hg vs.57.1±3.3 mm Hg,t=13.00, P=0.000）、+dp/dtmax（1 706.6±135.6 mm Hg/s vs. 1 313.3±96.2 mm Hg/s, t=6.28,P=0.000）、－dp/dtmax（1 132.8±112.1 mm Hg/s vs. 575.7±67.7 mm Hg/s,t=13.48, P=0.000）、CF（6.49±0.30 ml/min vs. 3.70±0.24 ml/min,t=28.60, P=0.000）與I/R組比較均升高；左心室舒張期末內(nèi)壓（10.9±1.7 mm Hg vs.26.2±1.5 mm Hg, t=－19.21, P=0.000),冠狀動(dòng)脈流出液中cTnI含量（0.62±0.01 ng/ml vs. 0.71±0.01 ng/ml，t=－12.00, P=0.000）均降低，AMI面積與I/R組比較減少20.8％（Plt;0.05）。IPo+5-HD組對(duì)心肌的保護(hù)作用與IPo組相似，但作用輕于IPo組。電子顯微鏡觀察結(jié)果表明，IPo和IPo+5HD可減輕I/R引起的心肌纖維和線粒體損傷。 結(jié)論 IPo對(duì)I/R心肌有保護(hù)作用，其作用與mitoKATP的激活有關(guān)。
目的 比較左心室輔助裝置(LVAD)和雙心室輔助裝置(BVAD)對(duì)缺血心肌再灌注后心臟血流動(dòng)力學(xué)、心肌能量代謝物質(zhì)和心肌超微結(jié)構(gòu)中線粒體形態(tài)的影響?！》椒ā?6只綿羊隨機(jī)分為L(zhǎng)VAD組和BVAD組，每組8只，常溫阻斷升主動(dòng)脈25分鐘，造成雙心室缺血損傷的動(dòng)物模型。結(jié)扎右頸內(nèi)動(dòng)脈遠(yuǎn)端，在心臟復(fù)跳后應(yīng)用轉(zhuǎn)子泵分別行LVAD(左心室-右頸內(nèi)動(dòng)脈徑路)和BVAD(左心室-右頸內(nèi)動(dòng)脈和右心室-肺動(dòng)脈徑路)輔助循環(huán)120分鐘。測(cè)定血流動(dòng)力學(xué)、心肌三磷酸腺苷、磷酸肌酸，觀察心肌超微結(jié)構(gòu)變化。 結(jié)果 施行BVAD或LVAD輔助循環(huán)的同時(shí)增加容量負(fù)荷能夠顯著改善心臟血流動(dòng)力學(xué)，但LVAD組右心房壓顯著高于BVAD組(P＜0.05)；BVAD組右心室心肌三磷酸腺苷、磷酸肌酸含量和心肌線粒體比表面值均高于LVAD組(P＜0.05)。 結(jié)論 BVAD比LVAD更有助于促進(jìn)雙心室缺血損傷心肌的功能恢復(fù)。
目的 研究不同甲狀腺功能狀態(tài)下，鼠缺血再灌注（Ischemia-reperfusion, I/R）心肌細(xì)胞肌漿網(wǎng)鈣三磷酸腺苷酶(SRCa2+-ATPase)基因(SERCA2a)表達(dá)的變化，以及三碘甲狀腺原氨酸(T3)對(duì)其變化的影響；探討基因調(diào)控在心肌保護(hù)中的作用。方法 將實(shí)驗(yàn)大鼠隨機(jī)分為甲狀腺功能正常組（A組），甲狀腺功能減退組（B組），兩組又分別分為正常對(duì)照組、單純灌注液組、T3灌注液組；利用離體心工作模型進(jìn)行灌注；采用Northern-Blot方法測(cè)定各組心肌細(xì)胞SERCA2a mRNA的相對(duì)含量。結(jié)果 B組心肌細(xì)胞、I/R心肌細(xì)胞SERCA2a mRNA的表達(dá)均明顯下降，而T3灌注液組其mRNA含量均顯著提高，A組和B組中單純灌注液組與T3灌注液組比較差別具有顯著性意義(P＜0.01)，其變化狀態(tài)與其心肌功能變化一致。結(jié)論 基因SERCA2a表達(dá)的顯著下降是心肌I/R損傷的重要機(jī)制；T3是SERCA2a基因表達(dá)的促進(jìn)劑，在I/R過程中可增強(qiáng)SERCA2a基因的表達(dá)，起到保護(hù)I/R心肌細(xì)胞、增強(qiáng)心肌功能的作用。
目的 探討三磷酸腺苷(ATP)作為衡量供者心臟保存質(zhì)量指標(biāo)的可靠性,以及ATP、心肌收縮力、超微結(jié)構(gòu)三者的關(guān)系.方法 新西蘭大白兔24只,隨機(jī)分為4組,1組:熱缺血0分鐘,低溫保存1小時(shí);2組:熱缺血0分鐘,低溫保存3小時(shí);3組:熱缺血5分鐘,低溫保存3小時(shí);4組:熱缺血10分鐘,低溫保存1小時(shí),每組6只大白兔.測(cè)定ATP含量和觀察超微結(jié)構(gòu),然后置于Langendorff模型上,用氧合自體溫血再灌注15分鐘,測(cè)定心肌收縮力.結(jié)果 1組收縮力和ATP分別為缺血前的84.67%和78.8%;2組為70.5%和57.7%;3組為32.67%和50.7%;4組為21.67%和49.7%.1組超微結(jié)構(gòu)呈輕～中度可逆損傷改變,2組呈中度可逆損傷改變;3組和4組呈重度不可逆損傷改變.結(jié)論 ATP是衡量供者心臟功能能否恢復(fù)的重要指標(biāo),ATP、心肌收縮力、超微結(jié)構(gòu)三者密切相關(guān).
目的 脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）后，內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞（neural stem cells，NSCs）能分化成神經(jīng)元促進(jìn)脊髓愈合，但其分子機(jī)制尚不清楚。研究三磷酸腺苷（adenosine-triphosphate，ATP）激活哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin，mTOR）/ 信號(hào)轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)導(dǎo)激活因子 3（signal transducers and activators of transcription 3，STAT3）通路在 SCI 中的生理和病理機(jī)制。? 方法 取 96 只健康成年雌性 SD 大鼠，體重 250 ～ 300 g，隨機(jī)分為 4 組（n=24）： A、 B、 C 組用改良 Allen 重物打擊法制作 T8 ～ 10 SCI 模型后， A 組以 ATP（40 mg/kg）、 B 組以等量生理鹽水、 C 組以 ATP（40 mg/ kg）加雷帕霉素（3 mg/kg）分別治療 7 d； D 組僅行椎板切除術(shù)，不損傷脊髓，等量生理鹽水治療 7 d。術(shù)后1、2、3、4 周采用 Basso-Beattie-Bresnahan（BBB）評(píng)分法評(píng)估大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能恢復(fù)情況，各時(shí)間點(diǎn)取材行免疫組織化學(xué)、Western blot、實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè)脊髓細(xì)胞標(biāo)志物神經(jīng)元特異性烯醇化酶（neuron-specifc enolase，NSE）、巢蛋白（Nestin）、神經(jīng)膠質(zhì)原纖維酸性蛋白質(zhì)（glial fbrillary acidic protein， GFAP）和通路因子mTOR、 STAT3的表達(dá)。? 結(jié)果 術(shù)后 1 ～ 4 周，A 組大鼠 BBB 評(píng)分呈持續(xù)升高趨勢(shì)，均高于 B、C 組，低于 D 組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）。實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè)顯示，術(shù)后 1 ～ 4 周 A 組 mTOR、STAT3、NSE mRNA 表達(dá)持續(xù)升高，Nestin mRNA 表達(dá)逐漸降低，但各時(shí)間點(diǎn)均高于 B、C、D 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）；而 A 組 GFAP mRNA 表達(dá)持續(xù)升高，但各時(shí)間點(diǎn)均低于 B、C組，高于 D 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）；各時(shí)間點(diǎn) B、C 組各指標(biāo) mRNA 表達(dá)與 D 組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01），?B、C 組間 mTOR、P-mTOR、STAT3、P-STAT3 mRNA 比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），余指標(biāo)表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。Western blot蛋白檢測(cè)結(jié)果與mRNA變化相似。? 結(jié)論 在大鼠體內(nèi)ATP能激活mTOR/STAT3通路，誘導(dǎo)內(nèi)源性 NSCs 增殖、分化為神經(jīng)元，有助于 SCI 愈合。
目的 三磷酸腺苷（adenosine triphosphate，ATP）可促進(jìn)脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）的修復(fù)，通過觀察ATP 聯(lián)合BMSCs 移植治療大鼠SCI 的療效，探討兩者在SCI 修復(fù)中的協(xié)同作用及其聯(lián)合移植治療SCI 的可行性。 方法 取1 只體重120 g 的雄性SD 大鼠股骨和脛骨骨髓，分離獲得BMSCs。將第3 代BMSCs 以BrdU 標(biāo)記，制備濃度為5.0 × 107 個(gè)/mL 的細(xì)胞懸液。將48 只體重240 ～ 260 g 的SD 雌性大鼠，采用改良Allen 打擊法制備T12 節(jié)段SCI 模型后，隨機(jī)分為4 組，每組12 只。聯(lián)合移植組（A 組）：將ATP（40 mg/kg）與6 μL BMSCs 細(xì)胞懸液混勻后，注射至損傷脊髓撞擊中央及距頭、尾側(cè)各1 mm 處，細(xì)胞數(shù)量約3.0 × 105 個(gè)；BMSCs 移植組（B 組）、ATP 移植組（C 組）及對(duì) 照組（D 組）：同A 組方法分別移植BMSCs 細(xì)胞懸液6 μL、ATP（40 mg/kg）及PBS（40 mg/kg）。術(shù)后觀察大鼠一般情況， 于 1、3、7、14、21、28 d 采用Tarlov 評(píng)分及Rivilin 斜板實(shí)驗(yàn)評(píng)分評(píng)價(jià)后肢功能恢復(fù)程度；28 d 處死大鼠后取材行組織學(xué)和免疫組織化學(xué)染色觀察SCI 修復(fù)情況。 結(jié)果 術(shù)后A 組1 只，B、C 組各2 只，D 組3 只動(dòng)物因感染或厭食死亡，其余動(dòng)物均存活至實(shí)驗(yàn)完成。各組動(dòng)物術(shù)后均出現(xiàn)后肢癱瘓癥狀，術(shù)后2 ～ 3 周開始有不同程度恢復(fù)，A 組最快，B、C 組次之，D組最差。術(shù)后1、3 d 各組間改良Tarlov 評(píng)分和Rivilin 斜板實(shí)驗(yàn)評(píng)分比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；術(shù)后7、14、21、28 d 除B、C 組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）外，其余各組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。術(shù)后28 d 組織學(xué)觀察示，A 組大鼠SCI 處無明顯空洞，損傷區(qū)內(nèi)無明顯瘢痕組織，有各種形態(tài)細(xì)胞形成，部分細(xì)胞有明顯分化特征；B、C 組SCI 處可見少量瘢痕組織填充，并有脊髓空洞形成；D 組脊髓斷端被瘢痕組織填充，可見大量炎性細(xì)胞和成纖維細(xì)胞浸潤(rùn)，并有較大脊髓空洞形成。免疫組織化學(xué)染色觀察顯示，A、B 組可見存活的BrdU 標(biāo)記陽性BMSCs，A 組BrdU 陽性細(xì)胞數(shù)多于B 組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；C、D 組未見BrdU 標(biāo)記陽性細(xì)胞。A 組神經(jīng)微絲蛋白200 和膠質(zhì)纖維酸性蛋白陽性細(xì)胞面積百分比高于B、C、D 組，B、C 組高于D 組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；B、C 組間比較差異無 統(tǒng) 計(jì)學(xué) 意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 ATP 對(duì)損傷后的大鼠脊髓有保護(hù)作用，ATP 與BMSCs 聯(lián)合移植可促進(jìn)其損傷脊髓修復(fù)。