華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 作者 包含"杜琳" 1條結(jié)果
  • 豬滑膜源性MSCs 體外多向分化潛能的研究

    體外分離培養(yǎng)豬滑膜源性MSCs(synovium-derived MSCs,SMSCs),探討其在體外多向分化潛能。 方法 2 月齡長楓雜交豬3 頭,雌雄不限,體重8 ~ 10 kg。取豬膝關(guān)節(jié)滑膜組織分離SMSCs 并行原代及傳代培養(yǎng),待第3 代SMSCs 長滿培養(yǎng)皿后,吸去基礎(chǔ)培養(yǎng)液,分別加入特定培養(yǎng)液進(jìn)行成軟骨、成骨、成脂誘導(dǎo)分化,作為實(shí)驗(yàn)組;以基礎(chǔ)培養(yǎng)液培養(yǎng)作為對照組。成軟骨誘導(dǎo)21 d 后行甲苯胺藍(lán)染色、免疫組織化學(xué)染色和實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測;成骨誘導(dǎo)10 d 后行ALP 染色檢測,21 d 后行茜素紅染色檢測;成脂誘導(dǎo)21 d 后行油紅O 染色檢測。 結(jié)果 SMSCs 培養(yǎng)24 h后細(xì)胞形態(tài)細(xì)長或呈多角形;48 h 后細(xì)胞數(shù)量增多;72 h 后可見大量紡錘形細(xì)胞,其間散在分布少許小圓形細(xì)胞。實(shí)驗(yàn)組成軟骨誘導(dǎo)21 d 后甲苯胺藍(lán)染色呈陽性,細(xì)胞外有蛋白多糖(Aggrecan)形成;免疫組織化學(xué)染色示特異軟骨基質(zhì)Col Ⅱ表達(dá);實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測示Col Ⅱ A1、Aggrecan、SOX9 mRNA 表達(dá)量與對照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。成骨誘導(dǎo)10 d 后ALP 染色陽性,21d 后茜素紅染色陽性,有鈣結(jié)節(jié)形成。成脂誘導(dǎo)21 d 后油紅O 染色示細(xì)胞內(nèi)有脂滴形成。對照組除ALP 染色觀察呈弱陽性外,余染色均呈陰性。 結(jié)論 豬膝關(guān)節(jié)滑膜組織可分離獲取SMSCs,其在體外具有向成軟骨、成骨、成脂多向分化潛能,有望成為組織工程種子細(xì)胞來源。

    發(fā)表時(shí)間:2016-09-01 09:07 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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