目的 對細菌來源的胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)所含生物活性物質及其在介導細菌-細菌間和細菌-宿主間相互作用中的機制進行綜述,并分析其對臨床植入物感染防治的指導意義。 方法 廣泛查閱近年來國內外細菌來源 EVs 相關的文獻,并進行分析和總結。 結果 無論是革蘭陰性菌(G– 菌)還是革蘭陽性菌(G+ 菌)都能分泌包含了多種生物活性物質(如蛋白質、脂質、核酸和毒力因子)的 EVs,可以介導細菌-細菌間和細菌-宿主間的相互作用,并在細菌的致病機制和生物膜形成等方面發(fā)揮重要作用。 結論 細菌來源的 EVs 包含的生物活性物質,在細菌感染性疾病的致病機制中發(fā)揮著重要作用,深入研究和理解其致病機制,可以為臨床早期診斷、預防和治療植入物感染等提供新思路。但目前該領域研究還處于初級階段,相關機制尚需深入研究。
目的 研究利用海藻酸鈉水凝膠和SIS 復合作為支架材料,接種軟骨細胞構建組織工程軟骨修復兔全層關節(jié)軟骨缺損的效果。 方法 采用機械法和去垢劑- 酶消化法制備SIS。取8 只2 ~ 3 周齡新西蘭白兔,肱骨頭和股骨髁負重面全層關節(jié)軟骨,體外培養(yǎng)軟骨細胞。將常規(guī)擴增培養(yǎng)的第4 代軟骨細胞用海藻酸鈉稀釋,軟骨細胞濃度為(5 ~ 7)× 107 個/mL,均勻涂刷于SIS 表面,制備軟骨細胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復合體。取6 月齡清潔級新西蘭白兔40 只,體重3.0 ~ 3.5 kg,根據(jù)處理方法不同隨機分為實驗組和對照組(n=20),建立單側膝關節(jié)4 mm × 4 mm 全層軟骨缺損模型(左右不限)。實驗組將復合體通過逐層疊加法置于缺損處,構建組織工程軟骨,表面縫合覆蓋一層SIS 薄膜將缺損完全填充;對照組以單純海藻酸鈉水凝膠填充軟骨缺損、覆蓋SIS 薄膜縫合。術后觀察動物一般情況,于術后1、3、5、7、9 個月,各組分別處死動物,行大體和組織學觀察。 結果 由于麻醉死亡、切口感染和腹瀉死亡,8 只動物被排除實驗,兩組分別余16 只動物進行取材觀察。術后1、3、5、7、9 個月,每組分別隨機處死3、3、3、3、4 只動物。大體觀察和組織學Masson染色結果顯示:實驗組術后1 個月,植入體表面的SIS 與宿主軟骨組織融合,邊界消失;3 個月,植入體部分軟骨化,界面融合;5 個月,植入體演變?yōu)槔w維軟骨;7 個月植入體內軟骨組織中纖維排列接近宿主軟骨;9 個月植入體內軟骨纖維排列紊亂,細胞代謝增生活躍。對照組觀察9 個月內缺損無明顯修復。組織學染色結果經(jīng)圖像量化分析顯示,實驗組各時間點缺損內修復組織單位面積染色強度均較對照組顯著升高(P lt; 0.05);術后3、5、7 個月,實驗組軟骨化程度逐漸增大(P lt; 0.05),9 個月較7 個月有所降低(P lt; 0.05)。 結論 利用軟骨細胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復合體表層縫合SIS 薄膜術構建的組織工程軟骨原位修復兔軟骨缺損,能促進軟骨組織再生,符合關節(jié)軟骨的生理性修復過程。
【摘 要】 目的 研究以聚-DL- 乳酸(poly-D,L-lactic acid,PDLLA)為載體復合rhBMP-2 接骨板的制備,并觀察其生物相容性,為臨床應用提供理論依據(jù)。 方法 將rhBMP-2 以0.05 mg/ 板與PDLLA 真空負壓抽吸復合,制備復合rhBMP-2 的PDLLA 接骨板。新西蘭大白兔32 只,雌雄不限,體重(3.0 ± 0.5) kg。制備雙側尺骨中段2.5 mm 骨及骨膜缺損模型。取右側為實驗組(n=32),采用復合rhBMP-2 的PDLLA 接骨板固定尺骨骨折處;左側為對照組(n=32),采用普通PDLLA 接骨板固定。于術后2、4、8 和12 周行大體、X 線片和組織學觀察,比較復合rhBMP-2 的PDLLA 接骨板與普通PDLLA 接骨板的生物相容性。 結果 復合rhBMP-2 的PDLLA 接骨板孔隙率為90%,孔徑150 μm,拉伸強度gt; 50 MPa,三點抗彎強度gt; 90 MPa,特性黏度1.6 dL/g(氯仿溶劑)。動物切口均于1 ~ 2 周Ⅰ期愈合,動物飲食及活動恢復正常,無肢體活動受限及跛行。兩種接骨板均固定牢固,骨折端無移位,材料逐步降解,實驗組接骨板降解較對照組快。X 線片:實驗組術后2、4、8 及12 周骨折修復的X 線阻射密度值分別為39.22 ± 2.48、48.79 ± 1.26、63.78 ± 1.78 及78.60 ± 1.25;對照組分別為33.83 ± 1.13、41.28 ± 1.25、55.23 ± 0.68 及66.54 ± 1.33,兩組各時間點比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.01)。組織學觀察,實驗組接骨板與周圍組織的相容性、成骨速度、骨再生量、再生髓腔結構等方面均優(yōu)于對照組;實驗組術后2、4、8 及12 周骨缺損區(qū)新骨形成面積百分比分別為0.106% ± 0.015%、0.292% ± 0.019%、0.457% ± 0.048%及0.601% ± 0.037%;對照組分別為0、0.193% ± 0.019%、0.339% ± 0.029% 及0.574% ± 0.047%;不同時間點兩組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05)。 結論 復合 rhBMP-2 的PDLLA 接骨板生物相容性良好,較之普通PDLLA 接骨板具有更良好骨誘導性和骨折修復能力。