目的研究絲裂原活化蛋白激酶亞單位細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(ERK)和p38蛋白激酶(p38 MAPK)在移植靜脈血管重塑過程中的表達。方法選Wistar大鼠80只，建立自體移植靜脈模型，術(shù)后隨機分為6 h、24 h、3 d、7 d、2周、4周、6周及8周組，于相應(yīng)時點取材，半定量逆轉(zhuǎn)錄PCR法檢測移植血管中ERK和p38 MAPK的mRNA表達； Western蛋白印跡定量檢測ERK和p38 MAPK的蛋白產(chǎn)物及磷酸化蛋白產(chǎn)物表達； 脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶末端標記法(TUNEL)檢測血管平滑肌細胞(VSMC)凋亡的變化； 免疫組化檢測增殖細胞核抗原(PCNA)的表達。 結(jié)果移植靜脈術(shù)后6 h，ERK1和p38 MAPK的mRNA表達均明顯增強，與正常靜脈組比較差異均有顯著性意義(P＜0.01)； ERK1 mRNA表達在移植后7 d達高峰，表達值為(33.2±14.2)%，p38 MAPK的mRNA表達于術(shù)后2周達到高峰，表達值為(58.8±26.2)%，與其余各時點比較差異有顯著性意義(P＜0.01)。Western蛋白印跡提示ERK1/2在術(shù)后1～2周達高峰，6周時逐漸恢復(fù)至正常水平； 而p38 MAPK則在移植后2～4周達高峰，之后開始減少，8周時仍維持一定表達量(1/4～1/2)。ERK1與PCNA表達呈正相關(guān)(r=0.759 6，P＜0.01)，p38 MAPK與凋亡呈正相關(guān)(r=0.892 2，P＜0.01)。結(jié)論MAPK的激活是移植靜脈內(nèi)膜增生以及血管重塑的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，可能成為防治移植靜脈狹窄、閉塞的新的治療靶點。
目的 探討銀杏葉提取物（GBE）對COPD大鼠氣道及肺血管重塑的干預(yù)作用。方法 Wistar大鼠40只，隨機分為正常對照組（A組）、造模不干預(yù)組（B組）、造模GBE早期干預(yù)組（C組）和造模GBE后期干預(yù)組（D組）。B、C和D三組采用慢性煙熏+脂多糖氣管內(nèi)注射建立COPD模型，C和D組分別在1~14 d和29~42 d腹腔內(nèi)注射GBE（0.40 mL/kg），43 d后對各組大鼠肺臟行病理學(xué)檢測。結(jié)果 B、C和D三組均有COPD特征性改變，但程度不同。A、B、C和D各組間肺泡平均面積、標準肺泡數(shù)比較均有顯著差異（P均lt;0.01）。C和D組管壁結(jié)構(gòu)輕度改變，支氣管平滑肌厚度/支氣管壁厚度比值、支氣管壁面積/支氣管面積比值與A、B兩組比較均有顯著差異（P均lt;0.01）。C和D組血管平滑肌細胞輕度增生，管壁輕度增厚，血管平滑肌細胞厚度/血管壁厚度比值、血管壁面積/血管面積比值與A、B兩組比較均有顯著差異（P均lt;0.01）。結(jié)論 GBE對COPD大鼠模型氣道重塑及肺血管重塑有抑制作用。
目的 通過研究不同吸煙量、吸煙持續(xù)時間及戒煙對大鼠氣道上皮細胞基質(zhì)金屬蛋白酶9( MMP-9) mRNA 及其蛋白表達水平的影響, 探討吸煙及戒煙與COPD 氣道重塑的關(guān)系。方法 雄性Wistar 大鼠40 只, 隨機分為對照組、長期大量吸煙組、短期大量吸煙組、長期小量吸煙組和長期大量吸煙后戒煙組, 每組各8 只大鼠。分別采用原位雜交和免疫組織化學(xué)方法檢測各組大鼠氣道上皮細胞中MMP-9 mRNA 及蛋白的表達水平。結(jié)果 ( 1) 各吸煙組大鼠均出現(xiàn)了肺氣腫的病理學(xué)改變, 長期大量吸煙組最嚴重。( 2) 長期大量吸煙組[ ( 22. 01 ±2. 86) PU, ( 20. 81 ±2. 46) PU] 、長期小量吸煙組[ ( 6.92 ±2. 71) PU, ( 8. 84 ±1. 80) PU] 、短期大量吸煙組[ ( 14.94 ±3. 46) PU, ( 13. 68 ±2. 00) PU] 及戒煙組[ ( 19. 00 ±3. 36) PU, ( 14. 82 ±1. 74) PU] 大鼠氣道上皮細胞MMP-9 mRNA 及其蛋白的表達水平均明顯高于對照組[ ( 0. 88 ±0. 88) PU, ( 2. 80 ±1. 66) PU, P 均lt;0. 01] 。( 3) 長期小量吸煙組、短期大量吸煙組和戒煙組大鼠氣道上皮細胞MMP-9 mRNA 及其蛋白的表達水平低于長期大量吸煙組( P 均lt;0. 05) 。結(jié)論 吸煙引起大鼠氣道上皮細胞MMP-9 mRNA 及蛋白的表達水平升高, 隨吸煙時間和量的增加其表達增加, 戒煙后其表達可下降。提示吸煙可以引起氣道破壞和重塑;戒煙可減輕氣道重塑, 是防治COPD 的有效措施之一
目的 探討呼吸道合胞病毒( RSV) 感染SD 大鼠肺內(nèi)神經(jīng)營養(yǎng)因子水平的變化, 及其與氣道神經(jīng)可塑性改變和氣道高反應(yīng)性間的關(guān)系。方法 1 ～2 周齡SD 幼鼠共20 只, 隨機分為正常對照組和RSV 感染組, 每組10 只。RSV 感染組采用每周1 次RSV 滴鼻法制作RSV 感染模型。第8周進行氣道阻力測定, 留取左肺行HE 染色觀察肺部病理學(xué)變化, 免疫組織化學(xué)染色檢測氣道突觸囊泡素( SYN) 和神經(jīng)絲( NF) 的表達, 原位雜交法檢測肺組織RSV RNA。ELISA 法檢測肺組織中神經(jīng)營養(yǎng)因子[ 神經(jīng)生長因子( NGF) 、腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子( BDNF) 、神經(jīng)營養(yǎng)因子3( NT3) 及神經(jīng)營養(yǎng)因子4( NT4) ] 水平。結(jié)果 RSV 感染組大鼠肺組織內(nèi)可見大量炎癥細胞浸潤, 原位雜交顯示肺間質(zhì)細胞中有明顯的RSV RNA 陽性信號, 表明模型建立成功。RSV 感染組氣道反應(yīng)性顯著增高, 氣道感覺神經(jīng)元SYN 及NF 的表達顯著增高, 肺部NGF 及BDNF 水平較對照組明顯增高( P lt;0. 05) , 而NT3 及NT4 水平與對照組無顯著差異( P gt; 0. 05) 。NGF 及BDNF 濃度與氣道SYN 表達呈正相關(guān)( r1 =0. 892, r2 =0. 995, P lt;0. 05) , 與NF表達呈正相關(guān)( r1 =0. 949, r2 = 0. 936, P lt; 0. 05) , 與氣道反應(yīng)性也呈正相關(guān)( r1 = 0. 929, r2 =0. 910, P lt;0. 05) 。結(jié)論 RSV 感染后肺部NGF、BDNF 水平增高, 并與氣道神經(jīng)可塑性變化和氣道高反應(yīng)性密切相關(guān)
【摘要】目的 探討同種異體骨髓間充質(zhì)干細胞( BMSC) 移植對慢性哮喘小鼠氣道炎癥和氣道重塑的影響。方法 40 只雌性BALB/ c 小鼠隨機分為正常對照組、BMSC 對照組、哮喘模型組和BMSC 治療組。從雄性BALB/ c 小鼠分離BMSC。用卵白蛋白( OVA) 制備慢性哮喘模型。觀察BMSC移植對慢性哮喘小鼠氣道炎癥和氣道重塑的影響, 并采用流式細胞術(shù)檢測BMSC 對脾組織CD4 + CD25 + 調(diào)節(jié)性T細胞比例的影響。結(jié)果 哮喘模型組支氣管上皮黏膜脫落, 上皮黏膜有杯狀細胞增生, 部分管腔內(nèi)有黏液栓塞, 氣道、血管旁有大量炎性浸潤, 以及氣道平滑肌細胞增生和肥大。正常對照組及BMSC 對照組無氣道炎癥及氣道重塑的表現(xiàn), 而BMSC 治療組氣道炎癥及氣道重塑明顯減輕。與BMSC 對照組及正常對照組比較, 哮喘模型組CD4 + CD25 + 調(diào)節(jié)性T細胞占淋巴細胞的比例顯著降低( P lt;0. 05) ; 與哮喘模型組比較, BMSC 治療組CD4 + CD25 + 調(diào)節(jié)性T 細胞占淋巴細胞的比例明顯提高( P lt;0. 05) ; BMSC 治療組與正常對照組及BMSC 對照組無顯著差異。結(jié)論 BMSC 移植能明顯減輕慢性哮喘小鼠氣道炎癥及氣道重塑程度, 并能上調(diào)外周CD4 + CD25 + 調(diào)節(jié)性T 細胞的比例。
目的 探討肥胖型哮喘小鼠體內(nèi)氧化應(yīng)激反應(yīng)變化及其與氣道炎癥和重構(gòu)的關(guān)系。方法 60 只雌性C57 /6J小鼠隨機分為哮喘組、肥胖組、肥胖哮喘組和對照組。哮喘組在普通飼料基礎(chǔ)上, 采用卵白蛋白腹腔注射致敏與霧化吸入激發(fā)的方法構(gòu)建哮喘模型; 肥胖組采用高脂飲食誘導(dǎo)肥胖模型; 肥胖哮喘組在高脂飼料基礎(chǔ)上, 采用卵白蛋白致敏激發(fā)構(gòu)建肥胖哮喘模型; 對照組以普通飼料飼養(yǎng), 生理鹽水致敏激發(fā)。12 周后收集小鼠支氣管肺泡灌洗液( BALF) 進行細胞計數(shù)及分類。 ELISA 法測定肺組織勻漿中IL-6 和8 異前列腺素2α( 8-iso-PGF2α) 水平。肺組織切片觀察小鼠病理變化, 測定氣管壁總面積( WAt) 、氣道平滑肌面積( WAm) 和管腔基底膜周長( Pbm) 。結(jié)果 肥胖哮喘組小鼠BALF 中白細胞總數(shù)和嗜酸粒細胞比例、肺組織IL-6 水平以及氣管壁總厚度( WAt/Pbm) 均較肥胖組、哮喘組明顯增高( P lt;0. 05) 。肥胖哮喘組的平滑肌層厚度( WAm/Pbm) 較肥胖組增高, 但與哮喘組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義( P gt;0. 05) 。肺勻漿8-iso-PGF2α水平按肥胖哮喘組、哮喘組、肥胖組、對照組的順序依次降低( P lt;0. 05) , 且與BALF 白細胞總數(shù)、WAt /Pbm及IL-6 水平呈正相關(guān)( r 值分別為 0. 828、0. 863 和0. 891, P lt;0. 01) 。結(jié)論 氧化應(yīng)激反應(yīng)參與了肥胖哮喘小鼠氣道炎癥和重構(gòu)過程。
目的 探討兒童漏斗胸微創(chuàng)手術(shù)矯治后胸廓骨的重塑及臨床療效。 方法 回顧性分析2009 年4 月至2010 年9月北京軍區(qū)總醫(yī)院74 例漏斗胸患者經(jīng)微創(chuàng)手術(shù)矯治的臨床資料，其中男63 例，女11例；年齡（11.90±8.50）歲，＜ 10 歲11 例。74 例患者于全身麻醉下在兩側(cè)腋中線做切口，在電視胸腔鏡下引導(dǎo)穿通器經(jīng)胸骨后創(chuàng)出通道，并抬舉胸骨成形后，再將制備好的支撐板置入胸骨后。術(shù)前和術(shù)后1周行胸部CT、胸廓CT 三維重建，矢狀位以胸椎體中心線為切線位，測量胸骨與胸椎體前緣的距離，并觀察心臟移位恢復(fù)情況和胸廓外形。結(jié)果 74 例均順利完成手術(shù)，無手術(shù)死亡。使用1根矯形板66例（89.19%），使用2 根矯形板8 例（10.81%）。使用1 根矯形板、年齡＜ 10 歲的11 例患者術(shù)后7 d 胸骨柄下端和胸骨體各部位與術(shù)前比較均向前移位3.76 ～ 22.92 mm，11 ～ 17 歲的55 例使用1 根矯形板患者胸骨體中間和下端與術(shù)前比較分別向前移位 2.08 mm和10 . 42 mm，兩者胸骨體下端較術(shù)前向前移位的距離比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=14.24, P ＜ 0.05）。術(shù)后7 d 時11 ～ 17 歲使用2 根矯形板患者胸骨柄下端和胸骨體各部位與術(shù)前比較向前移位4.19 ～ 15.03 mm。術(shù)后7 d 胸部CT 顯示65 例（87.84%）患者心臟位置恢復(fù)正常；用2 根矯形板患者胸廓外觀優(yōu)于用1 根者。隨訪74 例，隨訪率100%；隨訪時間6 ～ 23 個月，患者術(shù)前臨床癥狀消失，胸廓外形飽滿，心臟位置完全恢復(fù)正常。 結(jié)論 兒童漏斗胸微創(chuàng)手術(shù)矯治一次性成形具有良好的重塑性；隨著年齡增加，矯治支撐胸骨的力也需要增加，且療效滿意。
摘要： 目的 探討β受體阻滯劑對主動脈瓣重度狹窄行主動脈瓣置換術(shù)患者心室內(nèi)壓力階差及其左心室重塑的影響。 方法 選取鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2008年1月至2010年1月因單純主動脈瓣重度狹窄行主動脈瓣置換術(shù)患者56例，將術(shù)后得到隨訪的32例患者在相同基礎(chǔ)臨床特征下分為兩組，試驗組: 12例，常規(guī)口服β受體阻滯劑（倍他樂克6.25~2500 mg/次, 2次/天）；對照組： 20例，未服用β受體阻滯劑。在術(shù)后早期(1周內(nèi))、晚期（6~24個月）復(fù)查超聲心動圖，對兩組患者隨訪的超聲心動圖指標進行比較。 結(jié)果 兩組患者術(shù)后晚期隨訪無死亡，胸悶、氣促等癥狀均明顯改善。兩組患者術(shù)后晚期左心室收縮期末內(nèi)徑（LVESD）、左心室流出道內(nèi)徑（LVOTD）較術(shù)后早期均有增加，僅試驗組LVOTD與術(shù)后早期比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=-47.937, P=0.001）；兩組患者術(shù)后晚期室間隔厚度（IVS）、左心室后壁厚度（LVPWT）、左心室流出道射流速度（V）、心室壓力階差（G）、左心室心肌重量指數(shù)（LVMI）均較術(shù)后早期有所減小，以上指標試驗組術(shù)后晚期與術(shù)后早期結(jié)果比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（t=7.781, P=0.001；t=5.749, P=0.001；t=2.637, P=0.023；t=7.167, P=0.001；t=100.061，P=0.001），而對照組僅V、G和LVMI差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=4.051, P=0.001; t=4.759, P=0.001; t=-0.166, P=0.001）；試驗組EF值術(shù)后晚期與術(shù)后早期比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（t=-6.621, P=0.001）。組間比較：兩組術(shù)后晚期EF值差異無統(tǒng)計學(xué)意義（t=-0.354, P=0.726），但術(shù)后晚期左心室舒張期末內(nèi)徑(LVEDD)、IVS、G和LVMI兩組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（t=-2.494, P=0.018; t=-3.434, P=0.002; t=-2.171, P=0.038; t=-2.316, P=0.028）。 結(jié)論 重度主動脈瓣狹窄患者行主動脈瓣置換術(shù)后常規(guī)應(yīng)用β受體阻滯劑是安全、可靠的，可顯著降低其殘存的心室內(nèi)壓力階差，并可加速改善左心室的重塑。
目的 動態(tài)觀察移植靜脈再狹窄動物模型中血管外膜和膠原的變化，以評價血管外膜和膠原對內(nèi)膜增生和血管重塑的影響。 方法 長白豬18只，建立豬移植靜脈再狹窄模型，術(shù)后隨機分為3組，術(shù)后7d組，術(shù)后30d組和術(shù)后45d組，每組6只；未移植前的大隱靜脈作為對照組。采用HE和Masson染色，觀察各組血管成分結(jié)構(gòu)、外膜細胞密度、增生指數(shù)和膠原的動態(tài)變化。 結(jié)果 術(shù)后7d組新生內(nèi)膜形成并增厚，外膜厚度和細胞密度增大，外膜和新生內(nèi)膜中膠原增多，血管腔面積減少，但與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（F=2.03,P=0.091），而剩余狹窄率逐漸增大（F=5.16,P=0.033），重塑指數(shù)和外彈力板圍繞面積(EELA)稍有增大。術(shù)后30d組新生內(nèi)膜明顯增厚，外膜厚度和細胞密度達最大，新生內(nèi)膜中含大量膠原，呈進行性增多趨勢，外膜中膠原含量達最大，管腔面積和內(nèi)膜彈力板圍繞面積(IELA)明顯減小，剩余狹窄率較對照組明顯增大（F=6.63,P=0.018），重塑指數(shù)和EELA較術(shù)后7d組明顯減小。術(shù)后45d組新生內(nèi)膜增厚達最大，外膜細胞密度較術(shù)后30d組減?。‵=6.91,P=0.015），新生內(nèi)膜中膠原含量達最大，外膜中膠原含量較術(shù)后30d組減少，并見局部纖維化；管腔面積、重塑指數(shù)、IELA和EELA達最小，剩余狹窄率達最大。 結(jié)論 移植血管再狹窄是內(nèi)膜增生和血管重塑共同作用的結(jié)果。血管外膜的增厚、纖維化及膠原的重排對內(nèi)膜增生和血管重塑起著重要作用，參與并促進了移植血管再狹窄的發(fā)生過程。
目的 將骨髓間充質(zhì)干細胞（MSCs）種植于共聚乙交酯丙交酯(PLGA)補片上構(gòu)建組織工程心?。‥HT），在大鼠心肌梗死模型上觀察大網(wǎng)膜增加EHT血供，改善微環(huán)境后對心臟間質(zhì)膠原重塑及心功能的影響，為心肌梗死的外科治療提供新的途徑。 方法 結(jié)扎SD大鼠左冠狀動脈，制作心肌梗死模型。以大鼠MSCs為種子細胞構(gòu)建EHT，將符合心肌梗死標準的18只鼠隨機分成3組，每組6只，A組：網(wǎng)膜包裹EHT；B組：單純EHT移植；對照組：單純心肌梗死；另設(shè)假手術(shù)組（n=6）：僅開胸，不結(jié)扎冠狀動脈及EHT移植。EHT植入后4周，用二維超聲心動圖檢測心功能，彩色室壁運動（CK）方法檢測梗死部位心室壁運動，取標本做天狼猩紅染色在光學(xué)顯微鏡下觀察心肌改變。 結(jié)果 A組EHT植入后4周部分PLGA纖維降解，梗死部位心肌間質(zhì)膠原含量較B組和對照組明顯減少(Plt;0.05)。CK檢查顯示A組梗死部位心室壁運動較B組和對照組明顯改善(Plt;0.05)；A組左心室收縮期末內(nèi)徑（LVESD）和左心室舒張期末內(nèi)徑（LVEDD）較對照組和B組明顯減小(Plt;0.05)，左心室射血分數(shù)（LVEF）、左心室縮短分數(shù)（LVFS）較對照組和B組明顯增大（Plt;0.05)。 結(jié)論 大網(wǎng)膜包裹MSCsPLGA構(gòu)建的EHT覆蓋于梗死心肌表面能改善心肌梗死后間質(zhì)膠原重塑和梗死部位心室壁運動，有利于心功能的恢復(fù)。