目的 觀察15-脂氧合酶-1（15-LOX-1）基因轉移對氧誘導小鼠視網膜新生血管的抑制作用。 方法 7日齡C57BL/6J小鼠96只，隨機分為正常對照組、氧誘導視網膜病變（OIR）模型組、基因治療組和空白載體組。將小鼠與哺乳母鼠共同置于氧濃度為（75plusmn;2）%的氧箱內飼養(yǎng)5 d后轉移至正常環(huán)境中飼養(yǎng)5 d，建立OIR模型。小鼠出生后第12天基因治療組玻璃體腔注射攜帶增強型綠色熒光蛋白(EGFP)和小鼠15-LOX-1基因的重組腺病毒（Ad-15-LOX-1-EGFP）載體 1 mu;l；空白載體組注射等量攜帶EGFP的重組腺病毒（Ad-EGFP）載體。注射后第2天行視網膜鋪片熒光顯微鏡觀察EGFP的表達。注射后第5天行免疫熒光染色法、實時熒光定量聚合酶鏈反應和蛋白免疫印跡法檢測15-LOX-1-基因轉染視網膜的表達；視網膜鋪片觀察視網膜血管變化，測量視網膜無灌注區(qū)和新生血管的相對面積；石蠟切片蘇木精伊紅染色并計數突破視網膜內界膜的血管內皮細胞核。結果 Ad-15-LOX-1-EGFP注射第2天，視網膜鋪片上觀察到EGFP的表達。免疫熒光染色結果顯示,15-LOX-1基因轉染視網膜主要表達在外叢狀層、內核層和神經節(jié)細胞層?；蛑委熃M15-LOX-1蛋白和mRNA表達水平明顯高于OIR模型組和空白載體組，差異有統(tǒng)計學意義(t蛋白表達水平=22.74、24.13，tmRNA表達水平=12.51、13.40；P＜0.01)；基因治療組視網膜無灌注區(qū)和新生血管面積較OIR模型組和空白載體組顯著減小，差異有統(tǒng)計學意義(t無血管區(qū)面積=16.22、14.31，t新生血管面積=9.97、9.07；P＜0.01)；基因治療組中突破視網膜內界膜的血管內皮細胞核與OIR模型組和空白載體組比較明顯減少，差異有統(tǒng)計學意義(t=14.25、11.62，P＜0.01)。結論 15-LOX-1基因轉移不僅可以減少氧誘導小鼠視網膜無灌注區(qū)面積,并且對視網膜新生血管有顯著的抑制作用。
目的觀察抑制光損傷人視網膜色素上皮（RPE）細胞血管內皮生長因子A（VEGF-A）的表達對趨化因子受體3（CCR3）配體嗜酸細胞活化趨化因子（eotaxin）表達的影響。 方法體外培養(yǎng)人RPE細胞，取第8~12代生長良好的傳代細胞用于實驗。將同代細胞隨機分為正常對照組、光照損傷組和光照干預組。采用波長400 nm的藍色節(jié)能燈以（600±100）Lux持續(xù)光照RPE細胞12 h建立光損傷模型，光照干預組采用0.125 mg/ml的VEGF-A受體拮抗劑雷珠單抗處理光損傷的RPE細胞；正常對照組以錫箔紙包裹細胞培養(yǎng)皿避光培養(yǎng)。結束光照24 h時，應用實時聚合酶鏈反應、酶聯(lián)免疫吸附測定、蛋白免疫印跡法及免疫組織化學染色法檢測3組細胞中VEGF-A、eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3及核因子（NF）-κB的mRNA和蛋白表達情況。 結果光照損傷組VEGF-A、eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3、NF-κB的mRNA和蛋白表達較正常對照組明顯增加，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。光照干預組VEGF-A、eotaxin-1、eotaxin-2、eotaxin-3、NF-κB的mRNA和蛋白表達較光照損傷組明顯降低，差異也有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。 結論抑制光損傷后人RPE細胞VEGF-A的表達可以下調CCR3配體eotaxin的表達，其機制可能與阻斷轉錄因子NF-κB的激活有關。