目的 評(píng)價(jià)HAP 涂層鎳鈦記憶合金的組織相容性,為其在骨缺損修復(fù)的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方 法 取24 只青紫蘭兔,體重2.0 ~ 2.5 kg,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,每組12 只。行左側(cè)股外側(cè)切口,分離顯露股骨后,選取股骨下1/3 處手術(shù)鉆孔作為種植區(qū),實(shí)驗(yàn)組植入HAP 涂層鎳鈦記憶合金,對(duì)照組不植入材料。大腿后外側(cè)肌肉覆蓋缺損區(qū)。分別于術(shù)后7、14、28、56 d 每組各處死3 只動(dòng)物,取材行大體觀察、組織學(xué)觀察、BMP-2 免疫組織化學(xué)染色觀察及圖像灰度值分析,組織學(xué)觀察結(jié)果按照中華人民共和國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T16886.6-1997 從炎癥、纖維組織囊壁形成、材料降解及周邊組織反應(yīng)4 個(gè)方面進(jìn)行組織學(xué)評(píng)價(jià)。 結(jié)果 所有兔均存活至取材,兩組植入物完全包埋于骨組織內(nèi)部,無(wú)松動(dòng),無(wú)明顯骨吸收現(xiàn)象。材料植入后7 d,兩組炎性細(xì)胞浸潤(rùn)和纖維增生最明顯,纖維組織囊壁形成,植入材料呈大片狀被囊壁包裹;術(shù)后56 d,實(shí)驗(yàn)組部分標(biāo)本囊壁結(jié)締組織增生反應(yīng)仍較明顯,劣于對(duì)照組,但分級(jí)符合GB/T16886.6-1997 體內(nèi)植入標(biāo)準(zhǔn)。免疫組織化學(xué)染色示內(nèi)源性BMP-2 定位于多能MSCs、成骨細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi);兩組圖像分析結(jié)果顯示,BMP-2隨骨缺損的修復(fù)過(guò)程呈階段性分泌,兩組BMP-2 在術(shù)后14 d 時(shí)表達(dá)最高,以后逐漸降低。BMP-2 在各時(shí)間點(diǎn)染色灰度值比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P gt; 0.05)。 結(jié)論 HAP 涂層鎳鈦記憶合金作為生物醫(yī)學(xué)材料具有良好的骨組織相容性。
【摘 要】 目的 評(píng)價(jià)HA 復(fù)合rhBMP-2 的腺病毒(adenovirus mediated rhBMP-2,Adv-rhBMP-2)轉(zhuǎn)染的羊BMSCs 對(duì)骨痂延長(zhǎng)骨愈合的影響。 方法 成年山羊19 只,雌雄不限,體重15 ~ 20 kg。于每只羊髂嵴上穿刺抽取骨髓10 mL,常規(guī)傳代培養(yǎng)BMSCs。取第3 代BMSCs,以感染復(fù)數(shù)200 轉(zhuǎn)染腺病毒。取0.25% 胰蛋白酶消化轉(zhuǎn)染后3 d 的細(xì)胞1 ×108 個(gè),與HA 充分混勻制備Adv-rhBMP-2/BMSCs/HA。建立山羊右側(cè)脛骨延長(zhǎng)模型,術(shù)后立即于截骨部位注射自體細(xì)胞復(fù)合物。按術(shù)后注入物質(zhì)不同隨機(jī)分成4 組:A 組為Adv-rhBMP-2/BMSCs/HA 組(n=6),B 組為Adv-rhBMP-2/BMSCs 組(n=5),C 組為Adv-β-gal/BMSCs/HA 組(n=4),D 組為空白組(n=4)。術(shù)后第7 天開(kāi)始行脛骨延長(zhǎng),速度1 mm/d,共延長(zhǎng)4 周。術(shù)后5、8、12 周攝X 線片觀察骨痂生長(zhǎng)情況,12 周處死動(dòng)物,取標(biāo)本分別行骨密度檢測(cè)、生物力學(xué)測(cè)定、組織學(xué)觀察和骨形態(tài)計(jì)量學(xué)分析。 結(jié)果 X 線片檢查示,術(shù)后5、8 周A、B 組骨痂生成量明顯多于C、D 組,X 線片定量評(píng)分A、B 組明顯高于C、D 組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05);12 周各組均在骨延長(zhǎng)部位形成連續(xù)骨痂。骨密度測(cè)定:術(shù)后12 周A、B、C、D 組延長(zhǎng)部位骨礦物質(zhì)含量分別為(4.175 ± 1.921)、(2.600 ± 0.638)、(2.425 ± 0.826)和(1.175 ± 0.574) g,骨礦物質(zhì)密度分別為(0.612 ± 0.196)、(0.630 ± 0.159)、(0.450 ± 0.166)和(0.266 ± 0.113)g/cm2,A、B 組顯著高于C、D組(P lt; 0.05)。生物力學(xué)測(cè)定:A、B、C、D 組最大載荷分別為(490.20 ± 155.08)、(350.59 ± 80.48)、(221.95 ± 68.79)和(150.65 ± 92.29)N,彈性模量為(178.24 ± 105.80)、(105.88 ± 27.09)、(81.18 ± 48.67)和(50.35 ± 47.64)MPa,各指標(biāo)A組顯著高于C、D 組(P lt; 0.05)。組織學(xué)觀察見(jiàn)A 組骨延長(zhǎng)處大量新生骨組織,骨小梁多為縱行網(wǎng)狀排列。骨形態(tài)計(jì)量分析示A、B、C、D 組新骨體積分別為72.35% ± 5.68%、67.58% ± 7.42%、49.63% ± 4.87% 和38.87% ± 2.35%,A 組新生骨生成量明顯比D 組多(P lt; 0.05)。 結(jié)論 HA 復(fù)合rhBMP-2 修飾的BMSCs 制備的組織工程骨可促進(jìn)羊脛骨延長(zhǎng)骨愈合。
目的 探討雙層殼聚糖(chitosan,CS)/HAP 復(fù)合支架作為骨軟骨組織工程支架的可行性,并結(jié)合兔自體BMSCs 修復(fù)骨軟骨缺損。 方法 采用凍干法和燒結(jié)法制作雙層CS/HAP 復(fù)合支架,檢測(cè)其理化特性。取日本大耳白兔骨髓4 ~ 6 mL,全骨髓培養(yǎng)法分離純化BMSCs,并鑒定。調(diào)整第2 代BMSCs 細(xì)胞密度為2 × 107 個(gè)/mL,應(yīng)用纖維蛋白膠種植技術(shù),接種至雙層CS/ HAP 復(fù)合支架,體外構(gòu)建細(xì)胞- 支架復(fù)合物。取36 只日本大耳白兔,于右側(cè)膝關(guān)節(jié)股骨下端外側(cè)髁負(fù)重區(qū),作一直徑4 mm、深3 mm 的圓柱形缺損,制備兔膝關(guān)節(jié)骨軟骨缺損模型。根據(jù)缺損區(qū)植入物的不同,分為A、B、C 3 組(n=12)。A 組:植入細(xì)胞- 支架復(fù)合物;B 組:植入雙層CS/HAP 復(fù)合支架;C 組:不植入任何材料,作為空白對(duì)照組。術(shù)后6、12 周取材,行大體及組織學(xué)觀察,采用改良Wakitani 法評(píng)分。 結(jié)果 雙層CS/HAP 支架CS 層孔隙率為76.00% ± 5.01%,孔徑為200 ~ 400 μm,平均300 μm,孔洞相通;HAP 層孔隙率為72.00% ± 4.23%,孔徑為200 ~ 500 μm,平均350 μm,孔洞相通,結(jié)合部結(jié)合好。全骨髓法培養(yǎng)BMSCs,第7 天可見(jiàn)集落形成,14 d 傳代;免疫組織化學(xué)檢測(cè)示CD44(+)和CD45(—)。大體觀察和組織學(xué)檢測(cè)顯示,A 組基本修復(fù)軟骨缺損,骨缺損修復(fù)不良,有骨小梁長(zhǎng)入;B、C 組骨、軟骨缺損修復(fù)不良,組織學(xué)檢測(cè)以纖維組織或無(wú)新生組織形成,軟骨及骨缺損均明顯存在。術(shù)后6、12 周,A 組改良Wakitani 評(píng)分分別為(5.17 ± 1.17)分和(3.20 ± 0.75)分,均優(yōu)于B、C 組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論 雙層CS/ HAP 復(fù)合支架可作為骨軟骨組織工程支架,復(fù)合BMSCs 可修復(fù)兔關(guān)節(jié)軟骨與骨缺損,重建關(guān)節(jié)解剖結(jié)構(gòu)
目的評(píng)估機(jī)器學(xué)習(xí)算法在心臟瓣膜病心房顫動(dòng)患者心臟血栓形成的預(yù)測(cè)和表征中的應(yīng)用。方法本研究從四川大學(xué)華西醫(yī)院及其分院收集2016—2021年心臟瓣膜病伴心房顫動(dòng)患者的臨床數(shù)據(jù),從2 515例接受瓣膜手術(shù)的患者中篩選出886例瓣膜病伴心房顫動(dòng)患者納入研究,其中男545例(61.5%)、女341例(38.5%),平均年齡(55.62±9.26)歲,192例患者術(shù)中證實(shí)有心臟血栓形成。采用5種監(jiān)督機(jī)器學(xué)習(xí)算法來(lái)預(yù)測(cè)患者的血栓形成?;诨颊叩呐R床數(shù)據(jù)(特征篩選后的33個(gè)特征),采用10折嵌套交叉驗(yàn)證方法,通過(guò)曲線下面積、F1分?jǐn)?shù)以及馬修斯相關(guān)系數(shù)等評(píng)價(jià)指標(biāo)對(duì)模型的預(yù)測(cè)效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。最后,使用SHAP解釋方法來(lái)解釋模型,并以患者為例分析模型的特征。結(jié)果隨機(jī)森林模型各項(xiàng)綜合評(píng)估指標(biāo)最佳,受試者工作特征曲線下面積為0.748±0.043,準(zhǔn)確率79.2%。對(duì)模型的解釋和分析表明,每搏輸出量、二尖瓣E波峰值流速和三尖瓣壓力梯度等是影響預(yù)測(cè)的重要因素。結(jié)論隨機(jī)森林模型實(shí)現(xiàn)了最好的預(yù)測(cè)性能,有望被臨床醫(yī)生用作一種輔助決策工具,用于篩查患有瓣膜病心房顫動(dòng)的高栓塞風(fēng)險(xiǎn)患者。
目的 建立預(yù)測(cè)重癥慢性阻塞性肺疾病(簡(jiǎn)稱慢阻肺)患者死亡風(fēng)險(xiǎn)的機(jī)器學(xué)習(xí)模型,探討與慢阻肺患者死亡風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)的因素,并加以解釋,解決機(jī)器學(xué)習(xí)模型的“黑箱”問(wèn)題。方法 選取美國(guó)多中心急診重癥監(jiān)護(hù)?。╡mergency intensive care unit,eICU)數(shù)據(jù)庫(kù)中的8 088例重癥慢阻肺患者為研究對(duì)象,提取每次入住重癥監(jiān)護(hù)病房的前24 h內(nèi)的數(shù)據(jù)并隨機(jī)分組,70%用于模型訓(xùn)練,30%用于模型驗(yàn)證。采用LASSO回歸進(jìn)行預(yù)測(cè)變量選擇,避免過(guò)擬合。采用5種機(jī)器學(xué)習(xí)模型對(duì)患者的住院病死率進(jìn)行預(yù)測(cè)。通過(guò)曲線下面積(area under curve,AUC)比較5種模型和APACHE Ⅳa評(píng)分的預(yù)測(cè)性能,并采用SHAP(SHapley Additive exPlanations)方法解釋隨機(jī)森林(random forest,RF)模型的預(yù)測(cè)結(jié)果。結(jié)果 RF模型在5種機(jī)器學(xué)習(xí)模型和APACHE Ⅳa評(píng)分系統(tǒng)中表現(xiàn)出最佳的性能,AUC達(dá)到0.830(95%置信區(qū)間0.806~0.855)。通過(guò)SHAP方法檢測(cè)最重要的10種預(yù)測(cè)變量,其中無(wú)創(chuàng)收縮壓的最小值被認(rèn)為是最重要的預(yù)測(cè)變量。結(jié)論 通過(guò)機(jī)器學(xué)習(xí)識(shí)別危險(xiǎn)因素,并使用SHAP方法解釋預(yù)測(cè)結(jié)果,可早期預(yù)測(cè)患者的死亡風(fēng)險(xiǎn),有助于臨床醫(yī)生制定準(zhǔn)確的治療計(jì)劃,合理分配醫(yī)療資源。
目的 系統(tǒng)評(píng)價(jià)來(lái)曲唑+促性腺激素釋放激素拮抗劑方案對(duì)體外受精-胚胎移植(IVF-ET)中低反應(yīng)患者促排卵的有效性。方法 計(jì)算機(jī)檢索VIP、CNKI、PubMed、EMbase和FMJS,收集有關(guān)來(lái)曲唑+拮抗劑方案對(duì)體外受精-胚胎移植低反應(yīng)患者促排卵有效性的隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)或臨床對(duì)照試驗(yàn)。由2位評(píng)價(jià)員根據(jù)納入與排除標(biāo)準(zhǔn)獨(dú)立進(jìn)行文獻(xiàn)篩選、資料提取和質(zhì)量評(píng)價(jià)后,采用RevMan 5.0軟件進(jìn)行Meta分析。結(jié)果 最終納入6個(gè)研究,共977例患者。Meta分析結(jié)果顯示:對(duì)體外受精-胚胎移植中低反應(yīng)患者,來(lái)曲唑+拮抗劑方案與對(duì)照組相比,Gn用量[MD= –8.05,95%CI(–13.67,–2.43),P=0.005]、HCG日E2值[MD= –1 026.41,95%CI(–1 949.61,–103.20),P=0.03]均小于對(duì)照組;而兩組獲卵數(shù)[MD= –0.61,95%CI(–2.41,–1.19),P=0.51]和臨床妊娠率[OR=1.03,95%CI(0.53,2.02),P=0.92]無(wú)明顯差異。結(jié)論 對(duì)IVF-ET低反應(yīng)患者促排卵治療的有效性而言,來(lái)曲唑+拮抗劑方案較對(duì)照組臨床結(jié)局無(wú)明顯改善,但能減少Gn用量,降低IVF治療費(fèi)用。來(lái)曲唑+拮抗劑方案為卵巢低反應(yīng)患者提供了另一種臨床選擇。由于納入文獻(xiàn)存在質(zhì)量和數(shù)量不足以及方法學(xué)差異,建議本研究結(jié)論僅作為臨床分析的參考,尚需后效評(píng)價(jià)和不斷更新。
目的 制備并評(píng)價(jià)羧甲基殼聚糖-HA- 聚乙烯醇[carboxymethyl-chitosan/HA/ poly(vinyl alcohol),CHP] 共混膜片的理化性質(zhì)、眼內(nèi)生物相容性,探討其用于青光眼濾過(guò)手術(shù)的可行性。 方法 取羧甲基殼聚糖、HA、聚乙烯醇按 5 ∶ 4 ∶ 1(M/M)共混交聯(lián),用流延法制備CHP 共混膜片。測(cè)定膜片吸水率、溶脹比、通透性及力學(xué)性能。取新西蘭白兔結(jié)膜下組織,分離培養(yǎng)兔眼結(jié)膜下成纖維細(xì)胞,取第4 代細(xì)胞以5 × 103 個(gè)/mL 密度接種于貼附CHP 共混膜片(實(shí)驗(yàn)組)及不加膜片(對(duì)照組)的細(xì)胞培養(yǎng)板中培養(yǎng),于培養(yǎng)24、48、72 h 取細(xì)胞行MTT 檢測(cè)。將6 只新西蘭白兔隨機(jī)分為2 組(n=3),將CHP 共混膜片及SK 膠分別植入兔眼前房及結(jié)膜下,作為實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組。術(shù)后第1、3、5、9、11、20、30、45、60 天進(jìn)行裂隙燈觀察,記錄雙眼反應(yīng),第15 天實(shí)驗(yàn)組取角膜組織行掃描電鏡觀察,以研究共混膜片生物相容性和降解性。 結(jié)果 CHP 共混膜片吸水率為83.8% ± 1.3%,溶脹比為3.59 ± 0.50,干、濕態(tài)時(shí)抗張強(qiáng)度分別為(20.59 ± 1.73)、(0.51 ± 0.13)MPa,斷裂伸長(zhǎng)率分別為10.69% ± 1.16%、53.15% ± 2.46%。CHP 共混膜片對(duì) NaCl、L- 酪氨酸均有良好的通透性。接種后24、48、72 h 實(shí)驗(yàn)組吸光度(A)值分別為 0.207 ± 0.083、0.174 ± 0.080、0.181 ± 0.048,對(duì)照組分別為0.284 ± 0.011、0.272 ± 0.083、0.307 ± 0.056,組間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。術(shù)后第1 天實(shí)驗(yàn)組前房植入共混膜片周圍有少量絮狀物滲出;第3 天滲出物吸收;第11 天無(wú)明顯炎性反應(yīng);第60 天植入共混膜已大部分降解。術(shù)后15 d,掃描電鏡觀察示角膜內(nèi)皮細(xì)胞六邊形形態(tài)完整,表面無(wú)降解顆粒附著。對(duì)照組因SK 膠質(zhì)地軟,易斷裂,未能成功植入至前房。術(shù)后第1 天實(shí)驗(yàn)組結(jié)膜植入處結(jié)膜局部有輕度充血,第9 天恢復(fù)正常,至第60 天無(wú)角膜水腫、前房炎性反應(yīng)。對(duì)照組觀察結(jié)果與實(shí)驗(yàn)組相似。 結(jié)論 CHP 共混膜片具有較好的理化性質(zhì)及眼內(nèi)生物相容性,在青光眼濾過(guò)手術(shù)中具有潛在應(yīng)用價(jià) 值。
將成骨細(xì)胞與生物活性陶瓷復(fù)合培養(yǎng),賦于材料以“生命”活性,可能會(huì)產(chǎn)生一種新型人工材料。為研究成骨細(xì)胞與生物活性陶瓷間的關(guān)系,選用新西蘭大白兔,取脛骨外骨膜組織,經(jīng)胰蛋白酶及膠原酶分步消化,分離出成骨細(xì)胞,用RPMI-1640培養(yǎng)液傳代培養(yǎng)13代。通過(guò)對(duì)培養(yǎng)細(xì)胞堿性磷酸酶活性、體外礦化能力測(cè)定以及細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)觀察,證實(shí)其為典型的成骨細(xì)胞。將培養(yǎng)細(xì)胞分別在三種生物活性陶瓷,包括生物活性玻璃陶瓷(BGC)、羥基磷灰石(HA)和雙相羥基磷灰石(HA/TCP)中培養(yǎng)48小時(shí)后,利用掃描電鏡,3H-TdR,XRD,RS和EDXA等進(jìn)行綜合評(píng)價(jià)。結(jié)果表明:HA/TCP上培養(yǎng)成骨細(xì)胞較另兩種生物材料上顯示出更好的類成骨細(xì)胞形態(tài)和更高的細(xì)胞分化率。對(duì)成骨細(xì)胞與生物活性陶瓷反應(yīng)的機(jī)制進(jìn)行了討論,并分析了影響細(xì)胞生長(zhǎng)的材料因素,其結(jié)果為深入研究有生命的材料提供了依據(jù)。
目的:探討老年人自發(fā)性氣胸的臨床特點(diǎn)、治療及預(yù)后。方法:對(duì)本院在2005年11月至2008年4月間收治的79例老年人自發(fā)性氣胸患者臨床資料進(jìn)行回顧性分析。結(jié)果:老年人自發(fā)性氣胸大多有肺部基礎(chǔ)疾病,臨床表現(xiàn)缺乏特異性,本組誤診為慢性阻塞性肺病急性發(fā)作4例、左心衰2例、支氣管哮喘1例。氣胸類型: 張力性氣胸47例(72.1%),閉合性氣胸11例,交通性氣胸21例。采用以肋間閉式引流的為主的治療措施,效果好。結(jié)論:老年人自發(fā)性氣胸大多有肺部基礎(chǔ)疾病, 易誤診,氣胸的類型以張力性氣胸多見(jiàn),治療多需排氣減壓術(shù),及早的排氣減壓可望緩解癥狀,縮短肺復(fù)張時(shí)間,減少患者住院天數(shù), 降低死亡率,提高老年人生活質(zhì)量。
根據(jù)甲型H1N1流感病毒美國(guó)加利福尼亞毒株基因序列(A/California/07/2009(H1N1)),全基因合成甲型流感病毒血凝素(HA)編碼基因,利用輔助病毒依賴型腺病毒載體(HDAd)骨架質(zhì)粒pSC15B,構(gòu)建可表達(dá)HA基因的HDAd/HA DNA分子載體,以磷酸鈣法轉(zhuǎn)染293Cre4細(xì)胞,與輔助病毒H14連續(xù)共感染,獲得HDAd/HA載體,并大量制備和純化,進(jìn)行形態(tài)觀察和體外感染的初步鑒定。透射電鏡下觀察HDAd/HA載體具有典型腺病毒形態(tài);與輔助病毒H14共感染293細(xì)胞,RT-PCR檢測(cè)HA基因有轉(zhuǎn)錄,顯示成功構(gòu)建HDAd/HA重組腺病毒載體,為甲型流感病毒體內(nèi)免疫效果和免疫保護(hù)作用的研究奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。