目的 探討乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過程中bcl-2、bax及bad基因表達(dá)水平變化及與乳腺癌其他生物因素的相關(guān)性。方法 復(fù)習(xí)國(guó)內(nèi)、外相關(guān)文獻(xiàn)并進(jìn)行綜述。結(jié)果 在從正常乳腺組織到乳腺癌逐漸演化的過程中凋亡抑制基因bcl-2的表達(dá)水平變化尚有待進(jìn)一步研究，而凋亡促進(jìn)基因bax、bad的表達(dá)水平呈遞減趨勢(shì)。bcl-2基因表達(dá)水平與乳腺癌中一些公認(rèn)的正性因子如雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）呈正相關(guān)，與其他一些負(fù)性因子如p53、表皮生長(zhǎng)因子受體、c-erbB-2、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等呈負(fù)相關(guān)。bax基因的表達(dá)水平與乳腺癌ER、PR水平以及p53表達(dá)水平等無關(guān)。對(duì)于bad基因與乳腺癌其他生物因素的相關(guān)性尚未見報(bào)道。結(jié)論 乳腺癌中bcl-2基因表達(dá)水平的變化對(duì)乳腺癌預(yù)后以及治療的作用尚存在爭(zhēng)議，bad基因與乳腺癌預(yù)后的關(guān)系亦不清楚，而bax基因表達(dá)水平與乳腺癌的預(yù)后呈正相關(guān)。對(duì)于它們的研究將為我們?cè)u(píng)價(jià)乳腺癌的預(yù)后提供新的指標(biāo)，為乳腺癌的治療開辟新的思路。
目的 研究RNA干擾(RNAi)對(duì)兔血管平滑肌細(xì)胞（VSMCs）bcl-2基因表達(dá)的干擾效應(yīng)。方法 用脂質(zhì)體法將構(gòu)建的裝載靶向bcl-2基因小干擾性RNA(siRNA)的表達(dá)載體(pshRNA-bcl-2質(zhì)粒)轉(zhuǎn)染VSMCs（基因組），以轉(zhuǎn)染空載體的細(xì)胞和加DMEM的空白細(xì)胞作為對(duì)照，采用半定量RT-PCR 和Western blot法檢測(cè)bcl-2基因的表達(dá)，用MTT法檢測(cè)VSMCs生長(zhǎng)情況。結(jié)果 轉(zhuǎn)染siRNA的表達(dá)載體可以抑制內(nèi)源性bcl-2基因在轉(zhuǎn)錄和轉(zhuǎn)譯水平上的表達(dá)，基因組bcl-2的mRNA和蛋白表達(dá)較空載體組和空白對(duì)照組明顯減少(P＜0.01)； 基因組的VSMCs生長(zhǎng)也較空載體組和空白對(duì)照組明顯受到抑制(P＜0.01)。結(jié)論 載體介導(dǎo)的RNAi技術(shù)可明顯抑制內(nèi)源性bcl-2基因的表達(dá)和VSMCs生長(zhǎng)
目的研究抑凋亡基因bcl2和促凋亡基因bax在大腸癌及癌旁組織中的表達(dá)及意義。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法對(duì)31例大腸癌患者的癌組織及距癌組織外緣3 cm內(nèi)的癌旁組織和3 cm以遠(yuǎn)的正常大腸組織中bcl2和bax基因的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果大腸癌及其癌旁組織中bcl2蛋白表達(dá)陽性率分別為64.5%和60.0%，顯著高于正常組織（35.0%），P＜0.05； bax蛋白表達(dá)陽性率分別為45.2%和45.0%，顯著低于正常組織（60.0%），P＜0.05； 大腸癌組織與癌旁組織中bcl2和bax蛋白表達(dá)陽性率的差異無顯著性意義（Pgt;0.05）。bcl2和bax蛋白在大腸癌組織中的表達(dá)與其病理類型和臨床分期無明顯關(guān)系（Pgt;0.05）。結(jié)論大腸癌及其癌旁組織中有不同水平的bcl2蛋白過度表達(dá)和bax蛋白低表達(dá)，兩者通過參與調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡而與大腸癌的發(fā)生有關(guān)，但與大腸癌的病理類型、臨床分期無關(guān)。距大腸癌組織外緣3 cm以內(nèi)的癌旁組織應(yīng)視為癌前期組織，手術(shù)時(shí)應(yīng)切除。
應(yīng)用ABC免疫組化及半巢式PCR法分別對(duì)64例大腸癌組織中bcl-2的蛋白表達(dá)及重排進(jìn)行了檢測(cè)。結(jié)果：bcl-2基因異常表達(dá)與重排在大腸癌早期即已出現(xiàn)，隨著病程演變，發(fā)生率顯著增加；bcl-2基因的重排在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者亦明顯多于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。兩法聯(lián)合應(yīng)用相比較，以重排更能反映大腸癌分子特性。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果提示：bcl-2基因參與大腸癌發(fā)生發(fā)展過程的調(diào)節(jié)，并在大腸癌細(xì)胞的增殖、進(jìn)展及轉(zhuǎn)移中起重要作用；研究大腸癌bcl-2基因情況可用來預(yù)測(cè)治療效果和預(yù)后，亦為大腸癌治療設(shè)計(jì)新的抗癌藥物提供了新的靶分子。
為探討肝細(xì)胞肝癌發(fā)生過程中bcl-2蛋白的變化規(guī)律及與細(xì)胞凋亡變化的關(guān)系，運(yùn)用TUNEL法和免疫組化方法檢測(cè)石蠟保存的肝細(xì)胞肝癌組織(hepatocellular carcinoma, HCC)、肝硬變組織(liver cirrhosis,LC)和正常肝組織(normal liver, NL)中細(xì)胞凋亡發(fā)生率和bcl-2的表達(dá)。結(jié)果： 從NL、LC到HCC組織，細(xì)胞凋亡活性出現(xiàn)增強(qiáng)； bcl-2蛋白的表達(dá)逐漸下降，LC和HCC組比較，Ｐ＜0.05。結(jié)論： bcl-2的表達(dá)可能與肝細(xì)胞凋亡的抑制有關(guān)；在肝癌發(fā)生過程中，bcl-2表達(dá)下降可能是引起肝癌細(xì)胞凋亡增加的原因之一。
目的 探討三磷酸肌醇(IP3)和bcl-2基因表達(dá)變化在槲皮素治療裸鼠移植人肝細(xì)胞癌中的作用。方法 建立裸鼠移植人肝細(xì)胞癌模型，對(duì)照組腹腔注入含0.4% DMSO的RPMI 1640培養(yǎng)基0.05 ml/（g·d），槲皮素治療組腹腔注入槲皮素 50 mg/(kg·d)，3周后觀察肝癌生長(zhǎng)情況，并應(yīng)用IP3-［3H］ Birtrak Assay試劑盒檢測(cè)肝癌組織中IP3的含量,RT-PCR檢測(cè)肝癌組織中bcl-2 mRNA的表達(dá)，Western blot檢測(cè)肝癌組織中bcl-2蛋白的表達(dá)。結(jié)果 槲皮素治療組移植瘤體積和重量均明顯小于或輕于對(duì)照組〔體積: （15.8±10.1） mm3比（52.3±26.5） mm3，重量: （44.8±10.4） mg比（91.3±31.4） mg，P＜0.01〕； 肝癌組織中IP3含量明顯低于對(duì)照組〔（13.4±1.4） pmol/mg prot比（35.3±6.6） pmol/mg prot，P＜0.01〕，bcl-2 mRNA表達(dá)低于對(duì)照組但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〔RI（相對(duì)灰度與面積之積）: 0.55±0.05比0.79±0.19，P＞0.05〕，bcl-2蛋白的表達(dá)則明顯低于對(duì)照組〔RI: 1.07±0.12比6.69±1.80，P＜0.01〕。結(jié)論 槲皮素能減少IP3的生成,下調(diào)肝癌組織中bcl-2基因的表達(dá),抑制裸鼠移植人肝細(xì)胞癌的生長(zhǎng)。
目的探討多次熱療后殘存的肝癌HepG2細(xì)胞增殖速度變化及其相關(guān)的可能原因。方法HepG2細(xì)胞43 ℃加熱，每次80 min，2次/d，10個(gè)循環(huán)，分析細(xì)胞倍增時(shí)間，檢測(cè)細(xì)胞周期及bcl-2 mRNA及bax mRNA的表達(dá)。結(jié)果熱處理后的HepG2細(xì)胞增殖加快，細(xì)胞周期中G2期和S期細(xì)胞的比率增高，bcl-2 mRNA的表達(dá)增強(qiáng)，bcl-2/bax比值增大。結(jié)論熱處理后的HepG2細(xì)胞的增殖加快與其完成DNA復(fù)制而進(jìn)入分裂的細(xì)胞比率高、抗凋亡基因bcl-2 mRNA的強(qiáng)表達(dá)及bcl-2/bax比值的增加有關(guān)。