目的 探討p53基因第72位密碼子(Arg72Pro)多態(tài)性與胃癌高發(fā)區(qū)甘肅河西地區(qū)漢族人群胃癌遺傳易感性的關(guān)系，并探討Arg72Pro多態(tài)性與環(huán)境因素、胃癌發(fā)生部位、病理分型等的相互關(guān)系。方法 采用 Taq Man實時熒光定量PCR方法檢測140例胃癌患者、110例胃癌癌前病變患者以及125例健康人群的外周血標本p53基因Arg72Pro的多態(tài)性，并比較其不同的基因型與胃癌風(fēng)險的關(guān)系； 對胃鏡活檢以及手術(shù)切除標本應(yīng)用Warthin-Starry法(W-S法)判斷幽門螺桿菌（Hp）感染情況。結(jié)果 胃癌組、癌前病變組及健康對照組的Pro等位基因頻率分別為 0.543、 0.482和0.472，Pro基因型攜帶者的胃癌發(fā)病風(fēng)險是Arg/Arg基因型攜帶者的1.846倍〔95% CI (1.006~3.387)， P =0.046〕。經(jīng)Logistic回歸篩選確定了飲食、Hp感染、精神因素以及腫瘤家族史為胃癌的危險因素，并與Pro基因型具有加乘作用。p53基因型分布和胃癌的部位及病理分型具有相關(guān)性（ P ＜ 0.05） 。結(jié)論 p53 Arg72Pro多態(tài)性與甘肅河西地區(qū)漢族人群胃癌遺傳易感性相關(guān)，值得進一步進行功能學(xué)探討及大樣本人群驗證。
目的探討膽囊癌的發(fā)生與細菌L型感染和p21及p53基因突變的關(guān)系。方法采用免疫組化SP法和革蘭氏染色技術(shù)，對40例膽囊癌及40例慢性膽囊炎組織中的細菌L型和突變型p53蛋白及p21蛋白進行檢測，并對膽囊癌組織中的細菌L型陽性伴p21及p53蛋白陽性表達結(jié)果和細菌L型陰性伴p21及p53蛋白陽性表達結(jié)果進行對比分析。結(jié)果膽囊癌組織中革蘭氏染色細菌L型檢出率為77.5%(31/40)，明顯高于膽囊炎的57.5%(23/40)，P＜0.05，且與免疫組化細菌L型抗原表達陽性率〔80.0%(32/40)〕具有一致性； 膽囊癌組織中的p21及p53蛋白表達陽性率分別為62.5%(25/40)和65.0%(26/40)，明顯高于膽囊炎組織中的p21及p53蛋白表達陽性率〔2.5%(1/40)和5.0%（2/40）〕，P＜0.05； 膽囊癌組織中的細菌L型陽性者其p21及p53蛋白表達陽性率分別為75.0%(24/32)和78.1%（25/32）,明顯高于細菌L型陰性者的p21及p53蛋白的表達陽性率〔12.5%(1/8)，12.5%(1/8)〕，P＜0.05。結(jié)論細菌L型參與了p21及p53基因的突變，并在膽囊癌的發(fā)生中可能起協(xié)同作用。
目的 探討槐耳清膏在體外對人直腸癌HR8348細胞的生長抑制作用和凋亡誘導(dǎo)作用及其作用機理。方法 將處于對數(shù)生長期的HR8348細胞用含槐耳清膏的培養(yǎng)基培養(yǎng)36 h，用四氮唑藍（MTT）比色法檢測吸光度(OD)值，計算抑制率； 用甲基綠-派若寧染色法及TUNEL法檢測細胞凋亡指數(shù)； 用免疫組織化學(xué)方法檢測bcl-2、bcl-xl、bax、bak及p53基因表達的情況。結(jié)果 槐耳清膏對HR8348細胞的抑制率隨濃度增加而上升，濃度為4.0 mg/ml時抑制率最大（71.1%），與5-FU組（濃度為10 μg/ml）相比差異無顯著性意義（P＞0.05）。甲基綠-派若寧染色法和TUNEL法均可見到典型的細胞凋亡、凋亡小體或出泡現(xiàn)象，凋亡指數(shù)隨槐耳清膏濃度的增加而增加，當(dāng)濃度達4.0 mg/ml時，凋亡指數(shù)迅速上升，甲基綠-派若寧法為0.1620±0.0128，TUNEL法為0.2612±0.0158，均大于5-FU組的凋亡指數(shù)（0.0780±0.0095和0.1028±0.0131），P＜0.05?；倍甯嘟Mbcl2、bclxl、bak、p53蛋白表達較空白對照組明顯增強（P＜0.05)，而bax變化不明顯（P＞0.05）?；倍甯嘟Mbak/bcl-2 和bak/bcl-xl比值顯著大于空白對照組。結(jié)論 槐耳清膏在體外對人直腸癌HR8348細胞具有顯著的抑制作用和凋亡誘導(dǎo)作用?；倍甯嗾T導(dǎo)人直腸癌HR8348細胞凋亡可能與提高bak/bcl-2、bak/bcl-xl比值及上調(diào)p53基因表達有關(guān)。
目的 探討5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）體外誘導(dǎo)直腸癌HR8348細胞凋亡的作用及細胞凋亡與bcl-2、bcl-xl、bax及p53表達的關(guān)系。方法 經(jīng)5-FU處理HR8348細胞24 h后，用甲基綠-派若寧染色法和TUNEL法檢測細胞凋亡情況，并用SP免疫組織化學(xué)法檢測HR8348細胞中bcl-2、bcl-xl、bax和p53的表達。結(jié)果 HR8348細胞經(jīng)5-FU作用24 h后，細胞凋亡指數(shù)（AI）明顯高于對照組，差異有顯著性意義（P＜0.01）。5-FU作用不同時相bcl-2的表達評分結(jié)果與對照組比較差異均無顯著性意義； 不同時相bcl-xl的表達評分結(jié)果與對照組比較稍降低； 而bax的表達評分結(jié)果隨時間延長明顯增加，24 h、36 h的表達評分結(jié)果明顯高于對照組（P＜0.01），而p53在5-FU組和對照組各時相均未見表達。結(jié)論 5-FU具有誘導(dǎo)HR8348細胞凋亡的作用； 5-FU可能通過上調(diào)bax的表達并改變bax/bcl-xl的比值而誘導(dǎo)HR8348細胞凋亡。
目的 探討p53及c-erb B-2癌基因蛋白在乳腺非典型增生及癌變組織中的表達及其在非典型增生及癌變過程中與血管生成的關(guān)系。方法 對103例正常乳腺、乳腺非典型增生及乳腺癌組織的p53及c-erb B-2癌基因蛋白及第8因子相關(guān)抗原FⅧ-RA進行免疫組化染色。對微血管內(nèi)皮細胞面積(MEA)進行CIAS定量測定，并分析p53及c-erb B-2與MEA的相關(guān)性。 結(jié)果 在輕度非典型增生組織中，p53癌基因蛋白陽性表達組MEA(4 194.89±498.599 8)高于陰性組(3 216.94±803.939 4,t=2.302 4,P＜0.05)。中重度非典型增生組織中，p53陽性組MEA(4 525.82±1 360.827 7)高于陰性組（3 564.61±687.064 6,t=2.179 4,P＜0.05）。c-erb B-2與MEA無相關(guān) 性(P＞0.05)。結(jié)論 在乳腺非典型增生及癌變過程中，p53癌基因蛋白表達與血管生成具有明顯相關(guān)性。
目的 探討p53基因第72位密碼子多態(tài)與瘢痕疙瘩遺傳易感性的關(guān)系。 方法 采用聚合酶鏈反應(yīng)反向斑點雜交、DNA直接測序方法，檢測了15例瘢痕疙瘩患者與15名正常人對照的p53基因第72位密碼子的基因型。結(jié)果 瘢痕疙瘩組的Pro等位基因及Pro/Pro基因型頻率明顯高于對照組(Ｐ值分別為0.035、0.030)，Pro/Arg、Arg/Arg基因型頻率在病例組和對照組的分布差異無顯著性。 結(jié)論 p53基因第72位密碼子Pro等位基因及Pro/Pro基因型可能是瘢痕疙瘩的易感因素。
目的 觀察外源性雌激素受體β1（estrogen receptor β1，ERβ1）基因轉(zhuǎn)染乳腺癌MDA-MB-231細胞后對p53基因表達和細胞凋亡的影響，探討ERβ1在乳腺癌中的生物學(xué)作用。方法 應(yīng)用脂質(zhì)體法將ERβ1真核表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至乳腺癌MDA-MB-231細胞中，分別用熒光實時定量PCR法、Western blot法檢測轉(zhuǎn)染前、后細胞中ERβ1與p53 mRNA和蛋白表達的變化，流式細胞儀檢測細胞凋亡率。細胞生長曲線顯示轉(zhuǎn)染前、后細胞增殖能力的改變。結(jié)果 轉(zhuǎn)染外源性ERβ1真核表達質(zhì)粒后，MDA-MB-231細胞中ERβ1及p53 mRNA和蛋白表達明顯增強（Plt;0.01）; 細胞凋亡率明顯增加（Plt;0.01），增殖能力明顯減弱（Plt;0.01）。結(jié)論 在乳腺癌中，ERβ1可以通過上調(diào)p53基因表達促進乳腺癌細胞凋亡，從而抑制乳腺癌細胞的增殖。
目的 介紹近年來抑癌基因p53和癌基因c-erbB-2與胃癌關(guān)系的研究進展。方法 收集近年來國內(nèi)、外關(guān)于胃癌中p53和c-erbB-2的相關(guān)文獻并進行綜述。結(jié)果 p53基因突變和c-erbB-2的過表達是胃癌發(fā)生中的常見事件。p53突變與胃癌的發(fā)生部位及其侵襲性生物學(xué)行為有關(guān); c-erbB-2的過表達可作為判斷胃癌預(yù)后的獨立參數(shù)。針對p53及c-erbB-2的基因靶向治療藥物也在不斷研究中。結(jié)論 深入研究p53與c-erbB-2基因在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用，將有助于清楚地認識胃癌的生物學(xué)行為，并為胃癌的基因治療提供理論依據(jù)。
目的 探討p53基因和hMLH1基因的突變是否是直腸癌發(fā)生的早期事件之一。方法 用PV-9000二步法免疫組化檢測技術(shù)對我院2003年2月至2009年7月期間的32例早期直腸癌、32例直腸腺瘤及30例正常直腸黏膜組織石蠟切片進行p53和hMLH1基因蛋白表達的檢測。結(jié)果 ①正常直腸黏膜組織、直腸腺瘤組織及早期直腸癌組織中p53蛋白表達陽性率分別為0(0/30)、59.38%(19/32)及68.75%(22/32),其在直腸腺瘤組織和早期直腸癌組織中的p53蛋白表達陽性率差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Pgt;0.05),但二者均明顯高于其在正常直腸黏膜組織中的表達(Plt;0.01); hMLH1蛋白在前述三種組織中的表達陰性率分別為0(30/30)、12.50%(4/32)和50.00%(16/32)，其在早期直腸癌組織中的表達陰性率明顯高于在直腸腺瘤組織和正常直腸黏膜組織中的表達（Plt;0.01）。②在直腸腺瘤組織和早期直腸癌組織中p53陽性表達同時合并hMLH1陰性表達者分別占9.38%(3/32)及37.50%(12/32)，二者間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.008)。③p53陽性表達和hMLH1陰性表達均與早期直腸癌的分化程度有關(guān)(Plt;0.05)，而均與患者的性別、年齡、腫瘤最大徑、浸潤深度及大便潛血均無關(guān)(Pgt;0.05)。④p53陽性表達與腺瘤的增生程度有關(guān)(P=0.009)，hMLH1陰性表達與腺瘤的增生程度無關(guān)(Pgt;0.05)。結(jié)論 p53基因和hMLH1基因的同時突變致癌作用明顯，可能是直腸癌發(fā)生的早期事件之一。
【摘要】目的 研究小分子泛素樣修飾體-1(small ubiquitin-like modifier-1，SUMO-1)在野生型p53基因誘導(dǎo)HepG2細胞凋亡中的作用。方法 用含人野生型p53基因質(zhì)粒pcDNA3-wtp53(pwtp53)、含人雙微粒體基因2〔（human double minute gene 2 (HDM2)； 鼠同源基因為MDM2〕質(zhì)粒pCMV-HDM1B(pMDM2)、含人SUMO-1基因質(zhì)粒pcDNA3-His6-SUMO-1(pSUMO-1)和空質(zhì)粒pcDNA3分別或同時轉(zhuǎn)染HepG2細胞，獲得各轉(zhuǎn)染細胞系，應(yīng)用Western blot檢測轉(zhuǎn)染后細胞中質(zhì)粒蛋白的表達及流式細胞技術(shù)檢測細胞凋亡比例。結(jié)果 轉(zhuǎn)染pwtp53和pMDM2質(zhì)粒的HepG2細胞均可見p53及MDM2蛋白條帶，同時轉(zhuǎn)染pSUMO-1質(zhì)粒的細胞分別可見被SUMO-1修飾的相對分子量較大的p53和MDM2蛋白條帶，在未轉(zhuǎn)染任何質(zhì)粒、僅轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒和pSUMO1質(zhì)粒的細胞中只檢測到少量p53蛋白表達。轉(zhuǎn)染pwtp53及pwtp53+pSUMO-1質(zhì)粒的HepG2細胞凋亡比例分別為(16.79±1.62)%和(18.15±1.36)%，轉(zhuǎn)染pwtp53+pMDM2+pSUMO-1質(zhì)粒的細胞凋亡比例為(14.06±1.84)%，轉(zhuǎn)染pwtp53+pMDM2質(zhì)粒的細胞凋亡比例則下降至(5.17±1.23)%，與前三者比較差異有顯著性意義(PH＜0.01)； 其他轉(zhuǎn)染系細胞中的細胞凋亡比例均≤2%，差異無顯著性意義。結(jié)論 SUMO-1通過與p53蛋白的結(jié)合或翻譯后修飾，抑制MDM2等癌基因蛋白對p53蛋白的降解，可增強p53抑癌基因誘導(dǎo)的細胞凋亡。