目的 探討經(jīng)肺動脈灌注抗腫瘤壞死因子-α抗體（TNF-αAb）對體外循環(huán)（CPB）肺損傷的保護(hù)作用及機(jī)制。 方法 健康新西蘭大白兔40只，體重2.0～2.5 kg，雌雄不拘，隨機(jī)分為4組，每組10只。Ⅰ組：CPB ＋單純肺動脈灌注液；Ⅱ組：CPB ＋肺動脈灌注TNF-αAb；Ⅲ組：單純CPB組；Ⅳ組：單純開胸。測定4組CPB前、后左、右心房血液中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、腫瘤壞死因子-α （TNF-α）、丙二醛（MDA）含量及氧合指數(shù)；取肺組織樣本，在光學(xué)顯微鏡和電子顯微鏡下觀察其病理變化和超微結(jié)構(gòu)改變，并動態(tài)觀察肺組織含水量、TNF-α mRNA表達(dá)及凋亡指數(shù)變化。 結(jié)果 與Ⅳ組比較，CPB后Ⅰ～Ⅲ組血漿中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、TNF-α、MDA含量、肺組織TNF-α mRNA表達(dá)、凋亡指數(shù)均顯著升高（P＜0.05）；肺組織含水量增加，而氧合指數(shù)顯著下降（P＜0.05），肺組織病理形態(tài)學(xué)發(fā)生改變。與Ⅱ組比較，CPB后Ⅰ組、Ⅲ組血漿TNF-α含量顯著升高［主動脈開放5 min： （220.43±16.44） pg/ml vs. （185.27±11.78） pg/ml，P＜0.05； （249.99±14.09） pg/ml vs. （185.27±11.78） pg/ml，P＜0.05］，凋亡指數(shù)均顯著升高（CPB停止即刻：60.7‰±13.09‰ vs. 37.9‰±7.78‰，P＜0.05；59.6‰±7.74‰ vs. 37.9‰±7.78‰，P＜0.05），血漿中性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)、MDA含量、肺組織TNF-α mRNA表達(dá)亦顯著升高（P＜0.05），肺組織含水量增加，而氧合指數(shù)顯著下降（P＜0.05），肺組織病理形態(tài)學(xué)改變明顯。與Ⅰ組比較，Ⅲ組上述指標(biāo)僅在CPB30 min顯著升高（P＜0.05），氧合指數(shù)顯著下降（P＜0.05）。 結(jié)論 TNF-αAb經(jīng)肺動脈灌注可明顯抑制CPB期間炎性肺損傷，并減少肺組織細(xì)胞凋亡的發(fā)生。
目的：了解大鼠腦出血后血腫周圍組織細(xì)胞凋亡與神經(jīng)元特異性烯醇化酶（NSE）的表達(dá)及大鼠神經(jīng)功能缺損程度的關(guān)系。方法：用膠原酶注入到大鼠尾狀核的方法制作腦出血模型。將大鼠分為腦出血、假手術(shù)組、正常組3組。采用蘇木素伊紅(HE) 染色、NSE免疫組織化學(xué)染色及TUNEL分別觀察各組在腦出血后第6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d時血腫周圍NSE及TUNEL的表達(dá)。用Longa評分法評價大鼠神經(jīng)功能缺損程度。結(jié)果：大鼠在膠原酶注入6 h后形成穩(wěn)定的血腫，在造模24～48 h神經(jīng)功能缺損程度最重；6 h即見到TUNEL陽性細(xì)胞的表達(dá)，在48 h最明顯；NSE從神經(jīng)元中漏出彌散到細(xì)胞間隙也在48 h達(dá)高峰。結(jié)論：腦出血血腫周圍凋亡與神經(jīng)功能缺損及NSE的變化有關(guān)，凋亡可能在腦出血的神經(jīng)損傷中起重要的作用。
摘要:目的:動態(tài)觀察大鼠腦出血后血腫周圍組織補(bǔ)體激活與細(xì)胞凋亡的規(guī)律。方法:用膠原酶注入到大鼠尾狀核的方法制作腦出血模型。將大鼠分為腦出血、假手術(shù)組、正常組3組。采用蘇木素伊紅(HE) 染色、免疫組織化學(xué)染色及原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUTP 缺口末端標(biāo)記法(TUNEL)分別觀察各組在腦出血后第6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d時血腫周圍補(bǔ)體C3、促凋亡基因(Bax)、抑凋亡基因(Bclxl)及TUNEL的表達(dá)。結(jié)果補(bǔ)體C3的表達(dá)峰值在24~48 h;TUNEL、Bax蛋白表達(dá)術(shù)后12h增加,48~72 h達(dá)高峰,而Bclxl蛋白表達(dá)高峰在48h。結(jié)論:大鼠腦出血后血腫周圍組織補(bǔ)體C3的表達(dá)增加與細(xì)胞凋亡的演變趨勢一致,C3與凋亡有相關(guān)。Abstract: Objective: To study the complement activation and apoptosis regular genes changes in the tissues of the perihematoma of intracerebral hemorrhage (ICH) in rats. Methods: Intracerebral hemorrhage was induced in rats by injection of bacterial collagenase into the caudate nucleus. Histopathological changes were studied in 6 h,12 h, 24 h, 2 d, 3 d, 5 d, 7 d after the injection. The immunohistochemistry and TUNEL analysis were performed. The expression of complement factor C3, the TUNELpositive cells, the proapoptotic gene expression (Bax) and the antiapoptotic gene (Bclxl) were examined. Results: The expression of C3 increased to its maximum between 2448 h. The TUNELpositive cells and Bax protein expression increased gradually and reached the peak level between 4872 h. The Bclxl protein reached the peak level at 48 h. The correlation analysis showed that the quantity of C3 was positively related to that of the TUNELpositive cells, but the bax protein was not related to Bclxl protein. Conclusion: The expression of complement factor C3 may contributes to the nerve injury after cerebral hemorrhage and relate to the apotosis in the tissues surrounding the hametoma in rats.
摘要:目的:探討卡配因抑制劑3（MDL28170）對新生大鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)神經(jīng)細(xì)胞凋亡的影響。方法:建立新生SD大鼠HIBD模型,治療組于缺養(yǎng)缺血后即刻、2 h、4 h腹腔內(nèi)注射MDL28170,對照組及手術(shù)組同時予生理鹽水。缺氧缺血后24 h用免疫組化方法觀察大腦皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)Caspase3 蛋白表達(dá)、TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡,觀察組織病理改變并計(jì)算海馬神經(jīng)元死亡數(shù),透射電鏡觀察細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。結(jié)果:缺氧缺血后24 h缺血側(cè)大腦皮質(zhì)及海馬CA1區(qū)Caspase3和TUNEL陽性細(xì)胞數(shù)較對照組明顯增加,透射電鏡證實(shí)有凋亡細(xì)胞;MDL28170可減少陽性細(xì)胞數(shù)量,抑制神經(jīng)元死亡,差異有顯著性(Plt;0.05)。結(jié)論:MDL28170可通過抑制神經(jīng)凋亡而對新生大鼠HIBD具有一定保護(hù)作用。Abstract: Objective: To investigate the effect of (Calpain inhibitor3) MDL28170 on neural apoptosis in a neonatal model of hypoxicischemic brain damage (HIBD). Methods: A neonatal model of HIBD was established, 7dayold SD rats were divided into three groups. The treatment group received MDL28170(ip) at 0 h,2 h,4 h after HI, whereas the other two groups were administered normal saline simultaneously. The expression of caspase3 (by immunohistochemistry), neural apoptosis (by TUNEL) in cortex and hippocampus ipsilateral to the insult were observed 24 h after HI; hippocampal CA1 neural loss and electromicroscopic changes were assessed at the same time. Results: Apoptotic body was observed by electromicroscopy. Caspase3 positive cells and apoptotic cells increased significantly in the ipsilateral cortex and hippocampal CA1 region compared to the control, and MDL28170 reduced the number of positive cells, attenuated CA1 neural loss with significance (Plt;0.05). Conclusion: It is suggested that MDL28170 may protect the brain of neonatal rats after HIBD by suppressing neural apoptosis.
目的:通過檢測髓母細(xì)胞瘤（Medulloblastoma）中凋亡抑制蛋白（survivin）的表達(dá)情況，探討它的臨床意義，為髓母細(xì)胞瘤的治療尋求新的思路。方法:對50例髓母細(xì)胞瘤及10例正常腦組織石蠟切片行免疫組化檢測，通過對survivin蛋白在髓母細(xì)胞瘤患者與正常腦組織中的表達(dá)差異，并運(yùn)用相關(guān)統(tǒng)計(jì)分析方法分析它在不同性別、年齡段、腫瘤大小、病理類型、臨床分期的表達(dá)差異及其與預(yù)后的相關(guān)性。結(jié)果:（1）髓母細(xì)胞瘤中survivin蛋白陽性表達(dá)率為72%，明顯高于正常腦組織的陽性表達(dá)率0%，二者表達(dá)差異明顯（Plt;0.01）；亞組分析發(fā)現(xiàn)在survivin蛋白陽性組（n=36）和陰性組（n=14）病例中，性別分布、腫瘤部位、腫瘤大小、病理分型等因素在兩者間無明顯差別（Pgt;0.05），而年齡及TM臨床分期在兩組間差異顯著（P分別為0.044和0.027）。（2）survivin陽性患者預(yù)后與和陰性組相比差異顯著（P=0.001）。結(jié)論:survivin可能參與了對髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞凋亡的調(diào)控，并對髓母細(xì)胞瘤的發(fā)生發(fā)展可能起著重要作用。由于survivin蛋白表達(dá)與髓母細(xì)胞瘤患者年齡、臨床分期及預(yù)后等也密切相關(guān)，可作為判斷病情和評價預(yù)后的指標(biāo)。
研究白介素6(IL-6)在過氧化氫誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞凋亡中的作用及其機(jī)制。方法：以人Ⅱ型肺泡上皮細(xì)胞A549細(xì)胞株為實(shí)驗(yàn)對象，MTT法檢測IL-6對A549細(xì)胞增殖活性的影響，TUNEL檢測法檢測IL-6對A549細(xì)胞凋亡率的影響，Western blot觀察caspase-3和caspase-9蛋白量的變化。結(jié)果：IL-6能夠增加A549細(xì)胞的增殖活性，減少其凋亡。與模型組相比，IL-6干預(yù)組的caspase-3和caspase-9的蛋白表達(dá)量明顯降低,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：IL-6能夠抑制過氧化氫誘導(dǎo)的肺泡上皮細(xì)胞凋亡，并且與caspase-3和caspase-9蛋白的表達(dá)量下降有關(guān)。提示IL-6對肺泡上皮細(xì)胞的保護(hù)作用可能是通過抑制細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白來實(shí)現(xiàn)的。
目的：觀察青蒿琥酯對脂多糖誘導(dǎo)的大鼠腎小球系膜細(xì)胞(glomerular mesangial cells,GMC)凋亡的影響。方法：用不同濃度的青蒿琥酯刺激脂多糖誘導(dǎo)增殖的大鼠腎小球系膜細(xì)胞，HE染色觀察凋亡細(xì)胞形態(tài)，DAPI熒光染色觀察細(xì)胞核凋亡情況，用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡率。結(jié)果：青蒿琥酯對系膜細(xì)胞凋亡有明顯誘導(dǎo)作用，呈一定劑量依賴性。結(jié)論：青蒿琥酯能夠劑量依賴性地誘導(dǎo)大鼠系膜細(xì)胞凋亡。
目的 探討同種異體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BM-MSCs）對大鼠肝臟熱缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。方法 取10只健康Wistar大鼠骨髓，體外分離、培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞，對其進(jìn)行生物學(xué)鑒定，并對門靜脈途徑移植入肝臟的間充質(zhì)干細(xì)胞行4，6-聯(lián)脒-2-苯基吲哚（DAPI）染色示蹤。建立大鼠70%肝臟缺血再灌注損傷模型，將32只雄性Wistar大鼠隨機(jī)分成假手術(shù)組（Sham組）、缺血再灌注組（I/R組）、維生素C治療組（VC組）及BM-MSCs組，每組8只，分別于再灌注24h后取材，檢測血清天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）和丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）水平，肝臟組織總超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量，并對肝臟組織行HE染色觀察病理學(xué)改變，TUNEL法檢測肝臟凋亡指數(shù)（AI）。結(jié)果 體外分離的BM-MSCs生長穩(wěn)定，增殖旺盛，表達(dá)CD29及CD44，不表達(dá)CD34及CD45； 大鼠肝臟缺血再灌注損傷模型穩(wěn)定，在肝臟組織切片內(nèi)見間充質(zhì)干細(xì)胞定植，多位于肝小葉中央靜脈周圍。VC組和BM-MSCs組的AST、ALT、MDA和AI均較I/R組低（P＜0.05），SOD均較I/R組高（P＜0.05）； BM-MSCs組的AST、ALT、MDA和AI均低于VC組（P＜0.05），SOD高于VC組（P＜0.05）。結(jié)論 BM-MSCs可通過減輕氧化應(yīng)激損傷和抑制肝細(xì)胞凋亡，來保護(hù)大鼠肝臟熱缺血再灌注損傷。
目的 探討乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過程中bcl-2、bax及bad基因表達(dá)水平變化及與乳腺癌其他生物因素的相關(guān)性。方法 復(fù)習(xí)國內(nèi)、外相關(guān)文獻(xiàn)并進(jìn)行綜述。結(jié)果 在從正常乳腺組織到乳腺癌逐漸演化的過程中凋亡抑制基因bcl-2的表達(dá)水平變化尚有待進(jìn)一步研究，而凋亡促進(jìn)基因bax、bad的表達(dá)水平呈遞減趨勢。bcl-2基因表達(dá)水平與乳腺癌中一些公認(rèn)的正性因子如雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）呈正相關(guān)，與其他一些負(fù)性因子如p53、表皮生長因子受體、c-erbB-2、腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況等呈負(fù)相關(guān)。bax基因的表達(dá)水平與乳腺癌ER、PR水平以及p53表達(dá)水平等無關(guān)。對于bad基因與乳腺癌其他生物因素的相關(guān)性尚未見報(bào)道。結(jié)論 乳腺癌中bcl-2基因表達(dá)水平的變化對乳腺癌預(yù)后以及治療的作用尚存在爭議，bad基因與乳腺癌預(yù)后的關(guān)系亦不清楚，而bax基因表達(dá)水平與乳腺癌的預(yù)后呈正相關(guān)。對于它們的研究將為我們評價乳腺癌的預(yù)后提供新的指標(biāo)，為乳腺癌的治療開辟新的思路。
【摘要】 目的 研究反義核酸技術(shù)封閉谷氨酰胺酶( GA) 基因?qū)β闶篌w內(nèi)胃癌細(xì)胞凋亡作用的影響。方法 將攜帶GA 反義基因的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞SGC27901 ,并將成功轉(zhuǎn)染的胃癌細(xì)胞接種于裸鼠皮下,獲得裸鼠胃癌移植瘤模型,通過TUNEL 技術(shù)檢測胃癌細(xì)胞凋亡的凋亡指數(shù); RT2PCR 技術(shù)檢測移植瘤細(xì)胞內(nèi)GA mRNA 的含量。結(jié)果 GA 反義基因質(zhì)粒載體成功轉(zhuǎn)染胃癌細(xì)胞后,腫瘤生長速度減慢,癌細(xì)胞凋亡增加,腫瘤細(xì)胞內(nèi)GA mRNA的含量減少。結(jié)論 GA 反義基因可抑制GA 基因的表達(dá),明顯促進(jìn)胃癌細(xì)胞凋亡。