目的 利用細胞示蹤技術(shù)探討骨髓間充質(zhì)干細胞(MSCs)治療慢性后肢缺血的相關(guān)機理。方法 采用密度梯度離心法結(jié)合直接貼壁法分離和培養(yǎng)大鼠MSCs,并以5-溴脫氧尿嘧啶核苷(BrdU)標記。采用線栓法制備8只Lewis大鼠慢性后肢缺血模型,將其隨機均分為MSCs移植組和對照組,分別于患側(cè)后肢肌肉注射MSCs和生理鹽水。分別于移植術(shù)后第7天和第14天,對其進行臨床觀察、后肢血流量測定及后肢血管造影,再于相應時間點處死大鼠,取患側(cè)后肢股四頭肌和腓腸肌,行HE染色及BrdU免疫組化染色。結(jié)果 移植術(shù)后14d,8只大鼠全部成活,移植部位均無壞死和腫瘤形成;MSCs移植組大鼠患側(cè)/健側(cè)后肢的血流灌注比值明顯增高(1.773比1.279),而血管造影結(jié)果提示2組大鼠的側(cè)支血管數(shù)量比值未見顯著增加(0.908比0.835)。HE染色結(jié)果示2組大鼠的股四頭肌及腓腸肌并未發(fā)生特殊的病理學變化。BrdU免疫組化結(jié)果顯示,陽性顆粒定位為股四頭肌及腓腸肌的間質(zhì)細胞和血管內(nèi)皮細胞;且MSCs的分布存在差異,移植術(shù)后7d腓腸肌內(nèi)陽性細胞所占比例明顯高于股四頭肌,而14d時則相反。結(jié)論 MSCs移植在術(shù)后早期可以提高血流灌注量,但這并非為增加了側(cè)支血管數(shù)量使然,MSCs移植后所引起的旁分泌效應可能在術(shù)后早期起著重要的作用。