目的 脂肪來源干細胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）是組織工程種子細胞的重要來源之一。探討低溫保存對hADSCs 體外生長特性及成骨分化潛能的影響，驗證凍存后的ADSCs 作為組織工程骨種子細胞的可行性。 方法 取自愿捐獻的經(jīng)脂肪抽吸術(shù)獲取人脂肪組織，采用膠原酶消化法分離hADSCs。取第2 代hADSCs 置于— 196℃液氮保存4 周后，37℃復蘇并測定細胞存活率。實驗分為兩組，實驗組為低溫保存的hADSCs，對照組為未經(jīng)低溫保存的hADSCs；均用成骨誘導液誘導培養(yǎng)。采用DNA 定量（Hoechst33258 熒光比色法）測定細胞體外增殖活性，ALP 染色及茜素紅染色法測定ALP 活性和Ca2+ 含量，觀察低溫凍存對細胞成骨能力的影響。 結(jié)果 低溫凍存復蘇后的hADSCs 存活率為90.44% ± 2.62%。兩組細胞數(shù)量隨成骨誘導時間延長不斷增加，7 d 達平臺期；ALP 表達活性也不斷增加，于成骨誘導11 d 達平臺期，且2 周時ALP 染色均呈陽性；成骨誘導3 周時兩組茜素紅染色均呈強陽性反應。兩組各時間點細胞數(shù)量、ALP 活性和Ca2+ 含量比較差異均無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 低溫保存的hADSCs 體外生長及成骨能力未發(fā)生顯著變化，可以作為組織工程骨的種子細胞。