目的 探討 霧化吸入前列腺素 E1 （ PGE1 ）對脂多糖（LPS）所致大鼠急性肺損傷（ALI）模型Th1/Th2的影響。方法 尾靜脈注射LPS復(fù)制大鼠ALI模型，PGE1霧化入寬大玻璃瓶內(nèi)讓大鼠自由吸入，用ELISA法檢測大鼠外周血和支氣管肺泡灌洗液（BALF）中干擾素γ（IFN-γ）、白細胞介素4（IL-4）的水平及IFN-γ/IL-4比值。結(jié)果 LPS組外周血及BALF中IFN-γ/IL-4比值較生理鹽水對照組（NS組）顯著升高（Plt;0.01），PGE1組外周血IFN-γ/IL-4（Th1/Th2）比值在6、12及24 h時間點顯著低于LPS組（Plt;0.01），而BALF中各時間點IFN-γ/IL-4（Th1/Th2）比值顯著低于LPS組（Plt;0.01）。結(jié)論 霧化吸入PGE1可使LPS所致大鼠ALI失衡的Th1/Th2趨于平衡，減輕LPS所致大鼠ALI。
目的 探討蘇木水提取物在心臟移植中的免疫抑制作用及其機制。方法 以Wistar大鼠為供者、SD大鼠為受者，建立異位（腹腔）心臟移植模型。96只SD大鼠隨機分為4組，每組24只。對照組：術(shù)前給橄欖油（8ml／kg·d）；A組：給環(huán)孢菌素A（5mg／kg·d）；B組：給蘇木水提取物（37．5g／kg·d）；C組：給蘇木水提取物（25g／kg·d）＋半量環(huán)孢菌素A（2．5mg／kg·d）。術(shù)后觀察移植心的存活時間，心肌組織學(xué)和超微結(jié)構(gòu)改變，術(shù)后3d和7d用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT—PCR）檢測移植心臟白細胞介素-2（IL-2）信使核糖核酸（mRNA）、白細胞介素-10（IL-10）mRNA的表達，用酶聯(lián)免疫吸附測定法（ELISA）檢測血清IL-2和IL-10的含量。結(jié)果 與對照組比較，A組、B組、C組移植心存活時間延長（P〈0．01），淋巴細胞浸潤和心肌壞死程度較對照組輕，心肌IL-2mRNA表達較對照組減弱（P〈0．01），IL-10mRNA表達較對照組增強（P〈0．01）。A組術(shù)后3d和7d，B組、C組術(shù)后3d血清IL-2水平較對照組明顯降低（P〈0．01），A組術(shù)后7d，B組術(shù)后3d血清IL-10較對照組增高（P〈0．05）。結(jié)論 蘇木水提取物在心臟移植后具有免疫抑制作用，可引起Th1向Th2免疫偏移。
目的 探討 Th1/Th2細胞因子信使核糖核酸 (m RNA)表達改變與心臟移植免疫耐受的關(guān)系?！》椒ā〔捎么笫蟾共啃呐K移植模型 ,將 30只大鼠隨機分成對照組、排斥反應(yīng)組、免疫耐受組 ,每組 10只。觀察移植心臟存活時間 ,供心病理學(xué)改變 ,受者脾和心臟中 Th1/Th2細胞因子白細胞介素 2 (IL - 2 )、γ干擾素 (IFN-γ)、白細胞介素 4(IL- 4 )、白細胞介素 10 (IL- 10 ) m RNA表達水平?！〗Y(jié)果 免疫耐受組供心存活時間為 85 .2 8± 7.4 8天 ,較排斥反應(yīng)組的 7.33± 1.0 3天顯著延長 (Plt;0 .0 1) ;排斥反應(yīng)組供心見大量炎性細胞浸潤 ,免疫耐受組供心僅見少量炎性細胞浸潤 ;排斥反應(yīng)組 Th1細胞因子 IL- 2、IFN- γ m RNA表達較對照組增強 ,免疫耐受組減弱 ;排斥反應(yīng)組 Th2細胞因子IL- 4、IL- 10 m RNA表達較對照組減弱 ,免疫耐受組增強?！〗Y(jié)論 Th1/Th2細胞因子的動態(tài)平衡在移植耐受中起重要作用 ,Th1向 Th2偏離是移植耐受的機制之一。
目的 研究實驗性自身免疫性葡萄膜視網(wǎng)膜炎（EAU）中T-bet的表達及意義 方法 Lewis大鼠28只，用視網(wǎng)膜S抗原與Freund完全佐劑免疫24只大鼠以誘導(dǎo)EAU模型，另外4只作為正常對照。免疫組大鼠分別于免疫后7、12、15、21 d被處死，取所有大鼠的眼球和脾臟，固定后制作眼組織平片和眼球及脾臟的石蠟連續(xù)切片。使用單克隆抗T-bet 和CD4的抗體，通過免疫組織化學(xué)細菌蛋白過氧化物酶法在上述組織平片及切片上進行免疫組織化學(xué)單染和雙染色，在光學(xué)顯微鏡下觀察并計數(shù)陽性細胞，數(shù)據(jù)經(jīng)SPSS 11.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析。 結(jié)果 正常眼和脾組織中均見少量T-bet陽性細胞；免疫后7 d，虹膜、視網(wǎng)膜及脾臟中T-bet的表達增加，免疫后15 d達高峰，免疫后21 d表達降低，但仍高于正常組。免疫組織化學(xué)雙染色顯示，T-bet陽性細胞中多數(shù)為CD4+。 結(jié)論 T-bet在EAU的發(fā)病中起著重要作用，其作用可能是通過激活輔助性T淋巴細胞1而實現(xiàn)的。（中華眼底病雜志，2004，20：172-174）
目的從動物水平探索白細胞介素27(IL-27)是否能減輕哮喘的過敏性氣道炎癥, 并在細胞水平進行相關(guān)機制研究。 方法將60只雌性C57/6J小鼠隨機分成對照組、哮喘組、IL-27滴鼻預(yù)防組和IL-27滴鼻治療組。在卵白蛋白(OVA)腹腔注射致敏與滴鼻激發(fā)誘導(dǎo)的小鼠哮喘模型基礎(chǔ)上, 加用IL-27干預(yù), 一種為"IL-27小劑量、多次預(yù)防模型", 另一種為"IL-27大劑量、寡次治療模型"。取肺組織進行HE染色和炎癥病理評分。小鼠脾臟純化的CD4+ T淋巴細胞進行體外分化實驗, 并加用IL-27處理, 用ELISA檢測IL-4的水平。CD4+ T淋巴細胞在不同強度的Th2環(huán)境下誘導(dǎo)分化, 用IL-27刺激細胞, 提取總蛋白, 行蛋白免疫印跡法檢測信號轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子1(STAT1)和STAT1磷酸化水平。 結(jié)果IL-27小劑量、多次預(yù)防給藥, 可以明顯抑制支氣管及血管周圍的炎癥細胞浸潤, 炎癥病理評分明顯低于哮喘組(P＜0.05), 而與治療組比較則差異無明顯的統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。IL-27能明顯抑制初始CD4+ T淋巴細胞向Th2方向分化, 且這種作用不依賴于γ干擾素和IL-10。IL-27的抑制作用是通過STAT1信號通路。在哮喘小鼠或高劑量IL-4培養(yǎng)分化環(huán)境中, CD4+ T淋巴細胞的STAT1磷酸化受損。 結(jié)論IL-27可抑制初始CD4+ T淋巴細胞向Th2分化的作用, 但對已朝Th2分化的細胞, 其抑制作用明顯減弱。IL-27的預(yù)防性效果比治療效果顯著。哮喘氣道局部業(yè)已存在已分化的Th2淋巴細胞是IL-27作用降低的原因之一。
目的 探索呼吸道合胞病毒( RSV) 感染的氣道上皮細胞對大鼠髓系樹突狀細胞( mDCs) 激活和功能的影響, 為研究RSV 誘發(fā)哮喘的機制提供依據(jù)。方法 大鼠氣道上皮細胞株進行培養(yǎng)。在對RSV 進行擴增和滴度測定后, 以不同作用時間、不同滴度的RSV 感染大鼠氣道上皮細胞。同時分離、培養(yǎng)擴增大鼠mDCs, 采用transwell 細胞共培養(yǎng)系統(tǒng)將大鼠氣道上皮細胞和大鼠mDCs共培養(yǎng)。其mDCs 通過RT-PCR 和流式細胞術(shù)檢測成熟標(biāo)志物和Th2 細胞因子的表達、同種異體混合淋巴細胞反應(yīng)( MLR) 。結(jié)果 大鼠mDCs 與RSV 感染的大鼠氣道上皮細胞共培養(yǎng)后出現(xiàn)功能性成熟, 包括大鼠mDCs 表面共刺激分子MHCⅡ 和CD86 的表達增多, OX40L 和TARC 的mRNAs 表達增高, 大鼠mDCs 刺激T 細胞增殖的能力增強。結(jié)論 RSV 感染大鼠氣道上皮細胞能夠促使大鼠mDCs 進一步成熟并且可能具有支持Th2 細胞分化和局部聚集的能力, 可能是RSV 誘發(fā)哮喘的一種機制。
支氣管哮喘( 簡稱哮喘) 是以樹突狀細胞( DC) 介導(dǎo)的Ⅱ型輔助性T 細胞( Th2) 優(yōu)勢免疫為特征的慢性氣道炎癥性疾病。哮喘氣道產(chǎn)生大量的促炎癥細胞因子, 募集嗜酸粒細胞、肥大細胞和淋巴細胞等炎癥細胞, 釋放一系列炎癥因子, 引起氣道炎癥、黏膜水腫、黏液分泌和血管擴張等過敏癥狀。其中, 來源于上皮細胞的胸腺基質(zhì)淋巴細胞生成素( thymic stromal lymphopoietin, TSLP) 在哮喘患者體內(nèi)高表達, 在Th1/Th2 免疫失衡中起重要作用, 業(yè)已引起廣泛關(guān)注。尤其隨著對TSLP和TSLP受體( TSLPR) 的成功克隆與測序, TSLP 活化DC、啟動Th2 免疫應(yīng)答的分子機制, 以及TSLP在哮喘炎癥上游階段中的功能逐漸被識別, 人們對哮喘的免疫學(xué)發(fā)病機制有了更新的認(rèn)識。
敲除與Th2 細胞活化相關(guān)的電壓依賴鈣通道可防止實驗性哮喘發(fā)生（Knocking down Cav1 calcium channels implicated in Th2 cell activation prevents experimental asthma） 【摘要翻譯】 研究理由: Th2 型細胞參與過敏性哮喘,這些細胞產(chǎn)生的細胞因子( IL-4、IL-5 及IL-13) 在過敏狀態(tài)時分泌增加。因此, 研究Th2 型細胞表達的對其功能具有重要影響的關(guān)鍵信號分子至關(guān)重要。我們既往的研究顯示二氫吡¤特異性調(diào)控Th2 細胞的功能。目的: 由于二氫吡¤可特異性與活化細胞的電壓依賴鈣通道( Cav1) 結(jié)合并調(diào)節(jié)其功能, 我們的主要目的是證實Th2 細胞特異性表達功能性的Cav1 相關(guān)通道, 抑制其功能可能抑制哮喘。方法: 我們通過定量PCR 和Western blot 檢測Th2 和Th1 細胞Cav1 通道表達。我們將Th2 細胞表達的Cav1 的異構(gòu)體進行測序, 并研究Cav1 反義寡核苷酸( Cav1AS) 是否影響Ca2 + 信號及細胞因子的產(chǎn)生。最后, 我們通過給OVA 鼻腔激發(fā)的BALB/c小鼠注射Cav1AS 轉(zhuǎn)染的OVA 特異性Th2 細胞研究Cav1AS在被動免疫哮喘動物模型中的作用, 并通過鼻腔給予此前進行過OVA 及氫氧化鋁免疫的BABL/ c 小鼠Cav1AS 和OVA溶液以研究Cav1AS 對主動免疫哮喘模型的影響。檢測和主要結(jié)果: 我們發(fā)現(xiàn)小鼠Th2 細胞而非Th1 細胞表達Cav1. 2和Cav1. 3 通道。轉(zhuǎn)染Cav1AS 抑制了鈣通路和細胞因子產(chǎn)生, 并導(dǎo)致Th2 細胞喪失過繼Th2 細胞誘導(dǎo)氣道炎癥功能。鼻腔內(nèi)給予Cav1AS 可抑制主動免疫導(dǎo)致的哮喘氣道炎癥和氣道高反應(yīng)性。結(jié)論: 這些結(jié)果提示Th2 細胞特異性表達Cav1. 2 and Cav1. 3 通道, 以此作為治療靶點可有效抑制動物模型的哮喘反應(yīng)。 【述評】 哮喘是一種Th2 型慢性氣道炎癥反應(yīng)疾病,目前機制未明。Th2 細胞在此過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用, 但Th2細胞活化機制不清楚。本文的研究發(fā)現(xiàn)Th2 細胞特異性表達Cav1. 2 和Cav1. 3 通道, 以Cav1AS抑制Cav1 通道的表達可抑制Th2 細胞功能進而抑制哮喘炎癥反應(yīng)。該研究揭示了哮喘氣道炎癥反應(yīng)的新機制, 為哮喘治療提供了新靶點。但是, Cav1 通道如何影響Th2 細胞的功能尚需進一步研究。其次, 有些基因在人類和小鼠表達并不一致, 特別是一些異構(gòu)體的表達水平不同, 甚至在功能上存在很大差異, 因此, 在哮喘患者中Cav1 通道的表達尚待研究。最后, Th2 功能失調(diào)在一些自身免疫性疾病中發(fā)揮重要作用, 因此, 如證實Cav1 通道可用于人類哮喘治療, 則該方法可能對其他一些自身免疫性疾病有治療作用。
【摘要】 支氣管哮喘是一種由多種細胞包括氣道的炎性細胞、結(jié)構(gòu)細胞和細胞組分參與的氣道慢性炎癥性疾病。臨床上少數(shù)患者通過充分的哮喘治療包括使用全身性激素治療后仍不能有效控制， 通常稱為“難治性哮喘”。免疫反應(yīng)在難治性哮喘發(fā)病機制中起重要作用，而Th1/Th2失衡貫穿于難治性哮喘發(fā)病的整個過程?，F(xiàn)就難治性哮喘中Th1/Th2失衡機制，以及影響因子（干擾素-γ、白介素-12、白介素-4、白介素-17，白介素-33和轉(zhuǎn)化生長因子-β等）的研究作一綜述，以深入探討難治性哮喘的發(fā)病機制。